Нервно-мышечный блокатор, его получение, фармацевтический состав и способ обеспечения нервно-мышечной блокады у животных

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ НЕРВНО-МЫШЕЧНЫЙ БЛОКАТОР, ЕГО ПОЛУЧЕНИЕ,ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ И СПОСОБ ОБЕСПЕЧЕНИЯ НЕРВНОМЫШЕЧНОЙ БЛОКАДЫ У ЖИВОТНЫХ(71) Заявитель ДЗЕ ВЕЛЛКАМ ФАУНДЕЙШН ЛИМИТЕД(72) Авторы Дерен Энтони ХИЛЛ, Джеффри Ллойд ТЕРНЕР(73) Патентообладатель ДЗЕ ВЕЛЛКАМ ФАУНДЕЙШН ЛИМИТЕД(57) 1. Физиологически приемлемая галоидная, сульфатная, фосфатная, гидрофосфатная, ацетатная, пропионатная,сукцинатная, малеатная или органосульфонатная соль 1-цис, 1-цис-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатри-децилен)бис-1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил-1-вератрилизохинолина, содержащая менее 5 по массе других ее геометрических и оптических изомеров. 2. Соль вератрилизохинолина по п. 1, содержащая менее 2 по массе других ее геометрических и оптических изомеров. 3. Органосульфонатная соль вератрилизохинолина по одному из пп. 1,2. 4. Мезилатная или бесилатная соль вератрилизохинолина по п. 3. 5. Бесилатная соль вератрилизохинолина по п. 4. 6. Фармацевтическая композиция, стимулирующая нервно-мышечную блокаду, включающая активный ингредиент вместе с фармацевтически приемлемым носителем, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента она содержит соль по любому из пп. 1-5 в эффективном количестве. 7. Способ получения физиологически приемлемой соли 1-цис, 1-цис-2,2-(3,11-диоксо-4,10 диоксатридецилен)-бис-1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил-1-вератрилизохинолина по п. 1, отличающийся тем, что смесь геометрических 1, 1-изомеров соответствующей соли подвергают хроматографии. 8. Способ обеспечения нервно-мышечной блокады у животных путем введения недеполяризующего нервно-мышечного блокатора, отличающийся тем, что в качестве недеполяризующего нервно-мышечного блокатора вводят путем инъекции соль 1-цис, 1-цис-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридецилен)-бис 1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил-1-вератрилизохинолина по п. 3 в дозе 0,1-0,6 мг/кг. Настоящее изобретение относится к изохинолиновому соединению, являющемуся нервно-мышечным блокатором. Нервно-мышечные блокаторы находят широкое применение в хирургической анестезии с целью расслабления скелетных мышц для облегчения работы хирурга. Эти средства находят также широкое применение в отделениях интенсивной терапии больниц для обеспечения долгосрочного расслабления мышц пациентов,интубированных с целью осуществления контролируемой вентиляции пациента. 3752 1 Бесилат атракурия (например, 2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридецилен)-бис-1,2,3,4-тетрагидро-6,7 диметокси-2-метил-1-вератрилизохинолин дибесилат является недеполяризующим нервно-мышечным блокатором, который впервые был применен в хирургии человека в декабре 1982 г. в Великобритании и годом позже в США. Соединение описано в описании к патенту Великобритании 1579822 и к патенту США 4179507. В настоящее время это средство находит широкое применение в хирургии и интенсивной терапии. Особенностью средства является самопроизвольное разложение путем отделения Хоффмана при физиологических значениях рН и температуры и путем гидролиза сложных эфиров, происходящего независимо от функций печени и почек. При использовании в хирургии бесилат атракурия применяется в виде смеси десяти оптических и геометрических изомеров. Геометрические и оптические изомеры бесилата атракурия перечисляются в . . . -. ., 1984-19,5, 441-450. Нервно-мышечные блокаторы, такие как бесилат атракурия, действуют путем блокады рецептора ацетилхолина в нервно-мышечном соединении. Однако при этом они блокируют также холинэнергический перенос в вегетативной нервной системе, что ведет к нежелательным побочным воздействиям на сердечно-сосудистую систему. Так, например, парасимпатическая блокада ведет к тахикардии и повышению давления, в то время как блокада симпатического ганглия вызывает брадикардию и понижение давления. Нервно-мышечные блокаторы имеют также тенденцию к высвобождению гистамина, который может вызвать у некоторых пациентов опасные для жизни анафилактоидные реакции. Антигенная группа в средствах расслабления скелетной мышцы представлена четвертичным или третичным аммониевым соединением, которое придает также этим средствам свойства нервно-мышечного блокирования. В этом отношении атракурий является слабым выделителем гистамина и, как и о других нервно-мышечных блокаторах, существуют отдельные сообщения об анафилактоидных реакциях, относящихся к лекарству. Нами обнаружено, что соли атракурия, в которых составляющая атракурия имеет определенную геометрическую и оптическую изомерную конфигурацию, обладают особенно выгодным сочетанием фармакологических свойств, благодаря которому эти соли обладают особыми преимуществами как нервно-мышечные блокаторы. Конкретной геометрической и оптической изомерной конфигурацией упомянутой выше составляющей атракурия является конфигурация 1-цис, 1-цис. Соли атракурия, обладающие такой конфигурацией, могут быть названы как соли 1-цис, 1-цис-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридецилен)-бис-(1,2,3,4 тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил-1-вератрилизохинолин). Ниже такие соли будут упоминаться как соли атракурия 1-цис, 1-цис. Согласно одной особенности настоящего изобретения мы предлагаем соль атракурия 1-цис, 1-цис, в которой практически отсутствуют другие геометрические и оптические изомеры. Соли атракурия 1-цис, 1-цис, являющиеся предметом настоящего изобретения, практически свободны от других геометрических и оптических изомеров, так что они обычно представляют собой примесь в размере менее чем 5 массовых , предпочтительно менее 2 массовыхот общей массы соответствующей смеси. В частности, указанные соли 1-цис, 1-цис, являющиеся предметом настоящего изобретения, в лучшем случае содержат а) менее чем 1 массовыйсоответствующих цис-транс-изомеров и/или менее 0,5 транстрансизомеров и/или б) обычно менее чем 5 массовых , предпочтительно менее 2 массовыхсоответствующих -изомеров. Для введения человеку, например, для использования в хирургии или терапии, например при анестезии,соли атракурия 1-цис, 1-цис, являющиеся предметом настоящего изобретения, должны включать физиологически приемлемый анион, причем предпочтительные анионы включают анионы галидов, т.е. хлоридов,бромидов или иодидов, сульфатов, фосфатов, кислого фосфата, ацетата, пропионата, сукцината, малеата и органосульфоната, например метансульфоната (месилат), бензолсульфоната (бесилат), р-толуолсульфоната(тосулат) и нафталинсульфоната, причем особенно предпочтительными являются анионы месилат и бесилат. Такие соли, содержащие физиологически приемлемый анион, будут упоминаться далее как физиологически приемлемые соли атракурия 1-цис, 1-цис. При синтезе соответствующей физиологически приемлемой соли могут быть применены соли атракурия,включающие физиологически не приемлемый анион. Что же касается особенно выгодного сочетания фармакологических свойств, упомянутых выше, то в ходе опытов на животных обнаружено, что соли атракурия 1-цис, 1-цис обладают значительно более высокой нервно-мышечной блокирующей способностью по сравнению с бесилатом атракурия в форме смеси геометрических и оптических изомеров при аналогичной длительности действия. Соли атракурия 1-цис, 1-цис демонстрируют также более низкий уровень возможного отрицательного воздействия на вегетативную нервную систему, включая симпатическую блокаду и парасимпатическую блокаду и при меньшей вероятности получения сходных с вызываемым гистамином побочных воздействий на сердечно-сосудистую систему, возникающих при терапевтических дозах, что обеспечивает повышение безопасности пациента по сравнению с бесилатом атракурия в форме смеси геометрических и оптических изомеров. 3752 1 Еще одним преимуществом солей атракурия 1-цис, 1-цис, являющихся предметом настоящего изобретения, является то, что они обеспечивают более эффективную нервно-мышечную блокаду при формировании меньшего количества продуктов разложения по сравнению с упомянутой выше смесью изомеров бесилата атракурия. Это преимущество особенно важно при использовании в процессе длительных хирургических операций и при интенсивной терапии, предусматривающей большие дозы и/или длительные периоды лечения. Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает а) физиологически приемлемые соли атракурия 1-цис, 1-цис согласно изобретению для использования в хирургии или медицинской терапии, например для анестезии, в частности, для достижения нервномышечной блокады животного или человека б) применение физиологически приемлемых солей атракурия 1-цис, 1-цис согласно изобретению при производстве фармацевтических составов для достижения нервно-мышечной блокады в) способ достижения нервно-мышечной блокады животного или человека, заключающийся во введении указанному животному достаточного для нервно-мышечной блокады количества физиологически приемлемой соли атракурия 1-цис, 1-цис согласно настоящему изобретению. Физиологически приемлемые соли атракурия 1-цис, 1-цис, являющиеся предметом настоящего изобретения, применяются обычно в хирургии или медицинской терапии, например для анестезии, путем введения солей соответствующему субъекту, например человеку, подходящими путями и в достаточных дозах, чтобы добиться желательного уровня нервно-мышечной блокады. Обычно соли вводят путем внутривенных или внутримышечных инъекций или, если необходимо, путем постоянного внутривенного вливания. Величина дозы вводимых солей будет меняться в зависимости от требуемой степени нервно-мышечной блокады, возраста и состояния пациента. Однако при введении внутривенным путем соли обычно применяют в дозе от 0,1 до 0,6 мг/кг, предпочтительно от 0,2 до 0,4 мг/кг. В случае введения вливанием соли обычно применяют в дозе от 0,1 до 0,6 мг/кг/час, предпочтительно от 0,2 до 0,4 мг/кг/час. Соли атракурия 1-цис, 1-цис, являющиеся предметом настоящего изобретения, обычно находят применение в хирургии или медицинской терапии в форме терапевтических составов, включающих такую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Такие составы предпочтительно приспосабливают к введению их путем инъекции или вливания, например в форме раствора, эмульсии или суспензии соли в фармацевтически приемлемой водной или безводной жидкости, например в стерильной воде, которая может дополнительно содержать, если потребуется, один или несколько подходящих наполнителей, таких как антисептики, антиокислители, буферные соединения, сгустители или суспензаторы. В таких жидких составах соль обычно содержится в количестве от 5 до 15, предпочтительно от 5 до 10 мг/мл. Кроме того, соли могут быть представлены в форме лиофилизированных твердых материалов, предназначенных для разведения водой для инъекций, или растворами декстрозы или солей. Составы, являющиеся предметом изобретения, обычно представлены или разделенными на дозы, например в виде ампул или одноразовых шприцев, или же в бутылках, из которых можно извлечь нужную дозу все составы должны быть стерильными. В заранее приготовленных дозах может содержаться от 10 до 250 мг, предпочтительно от 25 до 50 мг соли, являющейся предметом настоящего изобретения, представленные в виде раствора или лиофилизированного твердого материала. Соли атракурия 1-цис, 1-цис, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть приготовлены путем обработки соответствующей соли атракурия 1, 1 в условиях или при помощи реактивов,обеспечивающих отделение изомера 1-цис, 1-цис от соответствующих геометрических изомеров, содержащихся в указанной соли атракурия 1, 1. Отделение требуемой соли атракурия 1-цис, 1-цис в соответствии с указанным процессом удобнее всего осуществляется с помощью хроматографии, в особенности высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), хотя может также быть использована жидкостная противоточная хроматография или ионообменная хроматография. Особенно эффективное отделение нужной соли достигается путем ВЭЖХ с использованием колонны, заполненной двуокисью кремния или окисью алюминия, и подвижной фазы,состоящей из подходящей смеси растворителей, например смеси хлорированного углеводорода, такого как хлористый метилен, или ацетонитрил спирт, например алифатический спирт с короткой цепью, такой как метиловый, этиловый спирт или пропанол и сильная кислота, такая как бензолсульфокислота, метансульфокислота, р-толуолсульфокислота или фосфорная кислота. Обнаружено, что смесь хлористого метилена, метилового спирта и метансульфокислоты, предпочтительно в со отношении 80200,5, обладает особыми преимуществами, обеспечивая элюирование соли метансульфоната (месилата) из колонны. Аналогичным образом для элюирования соли бензолсульфоната (бесилата) предпочитается смесь растворителей из хлористого метилена, метилового спирта и бензолсульфокислоты (40005000,25). Элюированный раствор соли может быть затем промыт с целью удаления растворителей, таких как метиловый спирт и любая избыточная кислота, и отделен путем выпаривания от хлорированного углеводорода. Нужная соль может быть получена в твердом виде путем лиофилизации водного раствора соли или путем разведения в таком растворителе как эфир с последующим осаждением путем добавления неполярного растворителя, такого как петролейный эфир или циклогексан. 3752 1 Применяемая в качестве исходного материала в описанном выше процессе соль атракурия 1, 1 может быть приготовлена из -1,2,3,4-тетрагидропапеверина обычным образом, например способом, описанным в . . . -. ., 1984-19,5, 441-450. Настоящее изобретение иллюстрируют следующие примеры. Пример 1. а) Диакралат 1,5-пентаметилена. 1,5-пентанедиол (15,6 г) нагревали в кипящем толуоле (500 мл) с 3-бромированной кислотой (50,5 г) и следами р-толуолсульфокислоты в течение 4 часов. Охлажденный раствор толуола промыли затем водным раствором ацетата натрия и обработали триэтиламином (50 мл) с обратным стоком. Охлажденную смесь, полученную в результате реакции, тщательно промыли водой, чтобы удалить остатки триэтиламина и бромгидрата триэтиламина, после чего при пониженном давлении был выделен толуол. Продукт, диакрилат 1,5-пентаметилена (24,0 г, выход 75 ) был получен в виде палевой жидкости путем дистилляции в глубоком вакууме (температура кипения 90-95 С/0,1 мм рт.ст.). б) -тетрагидропапеверин Хлоргидрат-тетрагидропапеверина (105 г) развели в воде, а раствор сделали щелочным с помощью слабого раствора нашатырного спирта. Осажденное -тетрагидропапевериновое основание было растворено в толуоле, после чего отделенный растворитель подвергли выпариванию, чтобы получить основание в виде бледного желтого масла. Масло развели в метиловом спирте (1575 мл) и обработали -ацетил-лейцином (47,5 г). Раствор обработали диэтиловым эфиром (274 мл), после чего постепенно произошла кристаллизация -ацетиллецината -тетрагидропапаверина (35,5 г). После того как кристаллы были отфильтрованы, маточную жидкость подвергли выпариванию до низкого объема, чтобы получить твердый материал (100 г), который был затем рекристаллизован из кипящего ацетона (50 объемов). В ходе охлаждения появились кристаллы (74 г, 83-диастереоизомера, 17-диастереоизомера), который затем отфильтровывали. Твердый материал еще раз подвергли рекристаллизации из кипящего ацетона (50 объемов),получив 58,7 г -ацетиллецината -тетрагидропапеверина (97-изомера, 3-изомера). в)-ацетиллецинат -1,2,3,4-тетрагидропапаверина (58,7 г) развели водой и обработали нашатырным спиртом. Осажденное основание экстрагировали толуолом (600 мл) и, после выпаривания растворителя, получили его в виде масла (39,0 г). Основание -1,2,3,4-тетрагидропапаверина нагревали с 1,5-пента-метилен диакрилатом (10,7 г) и ледяной уксусной кислотой (3,0 мл) при температуре 70 С в течение 4 часов. Полученную в результате реакции смесь развели в толуоле (400 мл) и перемешивали с силикагелем 60 (Мерк, для колончатой хроматографии,70-230 меш), после чего подвергли фильтрации и выпариванию, получив желтое масло. Полученный продукт развели в ацетоне (600 мл), обработали щавелевой кислотой (9,3 г) и диоксалат (1,1)-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридекаметилен)-бис-1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-1 вератрилизохинолина) был осажден в виде белого твердого материала (54,2 г, выход 99 ), температура плавления 125 С, жидкостная хроматография высокого разрешения -97,8 . г) (1, 1)-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридекаметилен)-бис-(1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил 1-вератрилизохинолин)бензолсульфонат 1, 1)-бесилат атракурия).(1,1)-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридекаметилен)-бис-(1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-1 вератрилизохинолин)диоксалат (54,0 г) развели в воде (1,6 л) и обработали карбонат натрия, чтобы довести значение рН до 7,0. Осажденное основание экстрагировали в толуол (600 мл) и растворитель затем подвергли выпариванию,чтобы получить очень вязкое желтое масло (42,7 г). Масло в течение ночи обрабатывали метиленбензолсульфонатом(75 мл) при температуре окружающей среды. Продукт, (1, 1)-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридекаметилен)-бис(1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил-1-вератрилизохинолин)бензолсульфонат был выделен путем разделения воды и толуола. Водную фазу подвергли далее промыванию двумя аликвотами толуола и затем подвергли лиофилизации. Продукт (49,7 г, выход 80 ) был получен в форме бледного желтого твердого материала. Продукт представляет собой смесь изомеров (1, 1)-бесилата атракурия, а именно 1-цис, 1-цис, 1 цис, 1-транс и 1-транс, 1-транс в соотношении 58346, соответственно. д) (1-цис, 1-цис)-2,2-(3,11-диоксо-4,10-диоксатридекаметилен)-бис-(1,2,3,4-тетрагидро-6,7-диметокси 2-метил-1-вератрилизохинолин)метансульфонат(1-цис, 1-цис-месилат атракурия) Смесь изомеров (1, 1)-бесилата атракурия (10 г), полученную на стадии г) растворили в дихлорметане (50 мл) и закачали в колонку для хроматографии 500 х 50 мм, сжатую в осевом направлении и заполненную 250 г неоднородной окиси кремния крупностью 20-45 мкм, причем колонку элюировали смесью дихлорметана, метилового спирта и метансульфокислоты (80200,5). Были собраны фракции элюата колонки, и фракции, содержащие требуемый изомер 1-цис, 1-цис были объединены и промыты 10 -ным рассолом. Раствор дихлорметна подвергли выпариванию до сухого состояния, остаточное масло развели в воде, а значение рН раствора довели до 4,0 с помощью метансульфокислоты. Водный раствор лиофилизировали с целью получения соединения, указанного в заголовке (5 г) в форме белого твердого материала, который был определен как практически свободный от других оптических и геометрических 4(1-цис, 1-цис-бесилат атракурия) Были повторены стадии а), б), в) и г) примера 1. Продукт, полученный на стадии г) или отделили, как было описано, или подвергли хроматографии, как описано ниже. Смесь изомеров (1, 1) бесилата атракурия (1,5 г изомеров, выделенных на стадии г) или 3,5 г смеси, полученной в ходе реакции на стадии г) развели в дихлорметане (10 мл) и закачали в колонку для хроматографии 300 х 25 мм, сжатую в осевом направлении и заполненную 80 г окиси кремния в форме шариков диаметром 10 мкм,причем колонку элюировали смесью дихлорметана, метилового спирта и бензолсульфоновой кислоты(40005000,25). Были собраны фракции элюата колонки, и фракции, содержащие требуемый изомер 1-цис, 1 цис были объединены и промыты 10 -ным рассолом или водой. Раствор дихлорметана подвергли выпариванию до сухого состояния, остаточное бесцветное масло развели в воде, а значение рН раствора довели до 4,0 с помощью бензолсульфоновой кислоты. Водный раствор лиофилизировали с целью получения соединения, указанного в заголовке (0,5 г) в форме белого твердого материала, который был определен как практически свободный от других оптических и геометрических изомеров соединения, смесь с менее чем 5 массовыхтаких изомеров, в частности менее 3 массовыхсоответствующего 1-цис, 1-транс изомера и менее чем 3 массовыхсоответствующего 1-цис, 1-транс изомера. Продукт, анализ которого был выполнен с помощью 1 Н ЯМР (СС 3), оказался следующим 1,52(м, 7 СН 2-тридека), 1,63(м, 6 СН 2-тридека, 8 СН 2-тридека), 2,84(м, 1/2-4 СН 2, 1/2-СН 2-вератрил),3,15(м, 1/2-4 СН 2), 3,22(с, 3), 3,26(м, 2 СН 2-тридека, 12 СН 2-тридека), 3,34(с, ОСН 3), 3,47(м, 1/2-3 СН 2,1/2-СН 2-вератрил), 3,58(с, ОСН 3), 3,73(2 с, ОСН 3, ОСН 3), 3,84(м, 1/2-3 СН 2), 3,95-4,24(м, 5 СН 2-тридека,9 СН 2-тридека, 1 СН 2-тридека, 13 СН 2-тридека), 4,86(дд,3, 8, 1 Н), 5,87(с, 8 Н), 6,36(дц,8, 2, 6 Нвератрил), 6,42(д,2, 2 Н-вератрил), 6,48(с, 5 Н), 6,59(д,8, 5 Н-вератрил), 7,24(м, мета- и парабесилат), 7,78(ортобесилат). В следующих примерах иллюстрируются фармацевтические составы согласно настоящему изобретению,в которых активным ингредиентом является соль бесилата атракурия 1-цис, 1-цис согласно настоящему изобретению. Пример 3. Раствор для инъекций в разовых дозах активный ингредиент 50 мг бензолсульфоновая кислота до рН 3-4 вода для инъекций для приготовления 5 мл. Активный ингредиент разводят в воде для инъекций, а величину рН полученного раствора регулируют с помощью кислоты. Раствор стерилизуют фильтрованием и заливают в стерильные 5 мл ампулы. Пример 4. Многодозовый раствор для инъекций активный ингредиент 100 мг бензолсульфоновая кислота до рН 3-4 бензиловый спирт 90 мг вода для инъекций для приготовления 10 мл. Активный ингредиент разводят в воде для инъекций, а величину рН полученного раствора регулируют с помощью кислоты. Раствор стерилизуют фильтрованием и заливают в стерильные 10 мл ампулы. Пример 5. Раствор для инъекций, высушенный при минусовой температуре активный ингредиент 50 мг бензолсульфоновая кислота до рН 3-4 маннит 62,5 мг вода для инъекций для приготовления 2,5 мл. Активный ингредиент и маннит растворяют в воде для инъекций, а величину рН полученного раствора регулируют с помощью кислоты. Раствор стерилизуют фильтрованием и заливают в стерильные флаконы,после чего высушивают при минусовой температуре. Оценка фармакологических свойств. Оценка 1-цис, 1-цис сульфоната месилата атракурия (обозначенного ниже как соединение А) осуществляется, как описано ниже, в сопоставлении с обычной смесью геометрических и оптических изомеров (обозначаемых ниже как бесилат атракурия), чтобы определить нервно-мышечную блокирующую способность и влияние на симпатическую и парасимпатическую блокаду. 5 3752 1 а) Способы и материалы Нечистокровных самцов кошек (Питомник Юго-восточных лабораторий) весом 2,2-4,5 кг, анестезировали смесью пентовероналнатрия, дозой 7 мг/кг и альфа-хлорадозы, 80 мг/кг. Необходимый уровень анестезии поддерживался дополнительными дозами альфа-хлоралозы, вводимой в вену по мере потребности. Трахею каннулировали, и животных вентилировали посредством респирационного насоса Харвэрд эппэрэтс, в объеме 20 мл/кг комнатного воздуха со скоростью 20 ходов/мин. Артериальное давление крови измеряли через надрез в правой бедренной артерии, соединенной с преобразователем Р 23 Стэтхэм. Сердечные сокращения определяли по ЭКГ с использованием тахографа Грэсс. Правый шейный симпатический нерв был обнажен посредством надреза приблизительно в 5 см от верхнего шейного ганглия и помещен на экранированный двухполюсный платиновый электрод. Шейный симпатический нерв и блуждающий нерв раздражали на 10 сек каждые 5 мин с помощью стимулятора 88 Грэсс,используя следующие параметры 20 Гц, длительность 0,5 мсек и супрамаксимальное напряжение (10-15 В). Изометрические концентрации в третьем веке регистрировались во время напряжения в 5 г с помощью датчика смещения усилия РТ.03 Грэсс и самописца Грэсс. Напряжение отдыха третьего века составляло 5 г. Левую заднюю конечность жестко закрепили, отделили голенное сухожилие и соединили его с датчиком смещения усилия РТ.03 Грэсс. После сечения ствола седалищного нерва на экранированный биполярный платиновый электрод поместили малоберцовый нерв. Раздражения длительностью по 0,2 мсек и при супрамаксимальном напряжении прикладывали к нерву с частотой 0,15 Гц, используя для этого стимулятор Грэсс 88. Напряжение мышечного сокращения в передней голени подсчитывалось во время напряжения покоя нерва 50 г. Испытываемые соединения развели в буферном солевом растворе при значении рН 3,0, выдержали на льду и затем ввели через каннулу в правой бедренной артерии. Температуру пищевода определяли с помощью терморезисторного датчика Еллоу Спрингс, а температуру внутренностей поддерживали в пределах от 37 до 38 С с помощью теплового излучения. Все записи выполняли на многоканальном самописце Грэсс,модель 7. После завершения экспериментов котов умертвили путем введения в вену насыщенногоили пентаверонал-натрия. б) Полученные результаты. Значение 95 способности нервно-мышечного блокирования были рассчитаны по кривым эффекта. Значения 50 и 25 для тормозящего эффекта соединений на соответственно стимулирование парасимпатического и симпатического нерва были рассчитаны аналогичным образом. Результаты суммируются в следующей таблице. Отношение 50 ИнгибироОтношение 25 вание блуждающего нерва в Симпатическое ингибирование в сравнении с 95 сравнении с 95 бесилат атракурия 0,0920,010 17 34 соединение А 0,0620,008 27 60 95 рассчитали в мг/кг как свободное основание, на основе массы катиона атракурия. Соединение Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.