Плавовращающий изомер 6-/5-хлор-2-пиридил/-/4-метил-1-пиперазинил/-5карбонилокси-7-оксо-6,7-дигидро-5Н-пирроло-[3,4в]пиразина, способ его получения и фармацевтический состав на его основе

В связи с присутствием одного асимметричного атома углерода в положении -5 цикла 5 Нпиррол-3,4-Ьпиразина зопиклон в форме рацемата должен содержать строго эквимолярную смесь левовращающих и правовращающих изомеров.Было обнаружено, что правовращающий изомер зопиклона проявляет неохсиданньге свойства, не вытекающие из свойств рацемического зопиклона.Поэтому объектом настоящего изобретения является правовращающий изомер зопиклона, его получение и применение в фармацевтических составах. .Известно, что в рацемическом продукте чаще всего активен один из двух энантиомеров и с этой активностью может быть связано увеличение токсичности, при этом ДРУГОЙ энантиомер менее активен или вообще неактивен и менее токсичен. Для таких продуктов увеличение активности не компенсирует недостатки, вызванные возросшей токсичностью.В случае с зопиклоном неохсиданно обнаружено, что Правовращающий изомер не только более активен примерно в 2 раза, чем рацемат, но и менее токсичен, чем токсичность рацемата, и что левовращающий изомер одновременно практически неактивен, но более токсичен, чем рацемат. .Например, в опытах на мышах при оральном применении зопиклон проявляет токсичность (13140), близкую к 850 мг/кг, тогда как Правовращающий изомер имеет токсичность, близкую к 1,5 г/кг, а левовращающий изомер показывает значение 131.50, заключенное между300 и 900 мг/кг. При испытании на животных правовращающий изомер зопиклона показывает свойстваЧто касается силы действия, то основные тесты на успокаивающее и гипнотическое действие зопиклона, такие, как тест на сродство по отношению к центральным рецепторам бензодиазепинов согласно методике 1.С.В 1 апс 1 ат 1 и 1.1 и 1 оп 1. оГ Ыритоспешйзггу 40, 601, (1983),разработанной на основе работ Зчийгез и Вгаезтгир, Машге, 266, 732-734 (1977), тест на антогонистическую активность по отношению к конвульсиям, вызванным пентетразолом, согласно методике Ечетеп и Кйспагаз, 1.Р 11 аппасо 1 81, 402, (1944) или тест на рефлекс переворачивания у мьпци по методике 2 Ыпс 1 еп и Катал, Аауапсез п Рнаппасо 5, 213-291, (1967),показали, что правовращающий изомер примерно в 2 раза более активен, тогда как левовращающий изомер практически неактивен.Согласно изобретению, Правовращающий изомер зопиклона может быть получен из соответствующею рацемата обычными методами, такими как хроматография хиральной фазы,расщепление оптически активной соли или же стереоселекгивньтй энзиматическттй катализ с помощью подходящего микроорганизма или асимметрического синтеза.Более конкретно, правовращающий изомер зопиклона может быть получен путем расщепления зопиклона с помощью оптически активной кислоты, действуя в подходящем органи ческом растворителе.В качестве оптически активной кислоты, которая особенно подходит, можно назвать 1)-0,0-дибензоштвинную кислоту.Обычно работают в органическом растворителе, выбранном среди алифатических галогенных углеводородов, таких, как дихлорметан и нитрилы, такие, как ацетонитрил взятый один или в смеси.Действуя таким образом, соль правовращающего изомера выпадает в осадок, и левовращающий изомер экстрагируется из маточных кристаллизационньш растворов.Правовращающий изомер зопиклона выделяется из своей соли посредством основания,такого, как щелочь натрия.Правовращающий изомер зопиклона может использоваться для лечения состояний, связанных с дисфункцией центральной нервной системы.Правовращающий изомер зопиклона применяется, например, как снотворное, успокаивающее, расслабляюшее и противоконвульсивное средство.Однако, правовращающий изомер зопиклона более полезен для человека в качестве снотворного среддгва. Правовращающий изомер зопиклона, действуя на различные параметры сна, увеличивает его продолжительность и улучшает его качество, уменьшает количество ночных и ранних пробуждений.Изобретение относится к фармацевтическим составам, содержащим правовращающий изомер зопиклона или одну из его солей, приемлемых в фармакологии, в чистом виде или в присутствии растворителя, или покрывающего агента. Эти составы могут применятьсяВ качестве фармацевтически приемлемых солей можно назвать соли минеральных кислот(таких, как хлоргидраты сульфаты, нитраты, фосфаты) или же органических (такие, как ацетаты, пропионаты, сукцинаты, бензоаты фумараты, тартраты, теофилинацетаты, салицитаты фенолфталинаты, метилен-бис-бета-оксинафтоаты) или же замещенных производных этих кислот.Твердые составы для орального применения могут выпускаться в виде таблеток, пилюль,порошков и гранул. , В этих составах активный продукт, согласно изобретению, смешивается с одним или несколькими разбавителями, такими, как сахароза, лактоза или крахмал. Эти составы могут также включать другие вещества, отличные от разбавителей, например, связующие, такие,как стеарат магния.Жидкие составы для орального применения можно выпускать в виде эмульсий, растворов,суспензий, сиропов и элексиров, содержащих инертные разбавители, такие, как вода или углеводородные масла. Эти составы могут также включать вещества, отличные от разбавителей, например, смачиваюшие, подслащиваюшие и ароматизирующие.Составы для парентерального применения могут представлять собой стерильные водные или неводные растворы, суспензии или эмульсии. В качестве растворителя или носителей могут применяться пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, в частности,оливковое масло, и органические сложные эфиры, например, этиловый олеат. Эти составы могут содержать вспомогательные средства, в частности, смачивающие вещества, эмульгаторы и диспергаторьт. Стерилизация может проводиться многими способами, например, с помощью бактериологическото фильтра, путем ввода в состав стерилизующих добавок, посредством облучения или же нагревания. Они могут быть приготовлены в форме стерильных составов, которые способны растворяться в момент приема в стерилизованной воде или в другой стерильной разбрызгиваемой среде.Составы для ректального применения приготавливаются в виде свечей, которые могут содержать, кроме активного продукта, эксципинты, такие, как масло какао.При лечении людей дозы зависят от желаемого эффекта и продолжительности лечения обычно они заключены между 2,5 и 15 мг в день орально для взрослого человека.Следующие примеры, которые могут быть неограничены, иллюстрируют настоящее изобретение.К раствору 22,56 г П-0,0-дибензоилвинной кислоты в форме моногьщрата (006 моль) в 300 см 3 дихлорметана добавляют раствор зопиклона 23,28 г (006 моль) в 300 см 3 дихлорметана. Реакционную смесь концентрируют досуха под пониженным давлением. Полученную неочищенную соль перекристаллизовывают в 2000 см 3 ацетонитрила, в результате получают 21,3 г кристаллического продукта с выходом 46 и температурой плавления 160-165 С(с разложением), вращающая способность которого равна а а 83 (с 0,5 ацетон).Полученный продукт растворяют в 180 см дихлорметана при рафлюксе. Добавляют 200 Ссм 3 ацетонитрила и оставляют в покое на 1 час при температуре 5 С. Полученный кристаллизированный продукт перекристаллизовывают при тех же условиях. Таким образом, получают 16,5 г кристаллизованной соли с выходом 3696 и температурой плавления 160-165 С(с разложением), вращающая способность которого равна а 102 (с 0,5 ацетон).Полученная таким образом соль растворяется в 125 см воды в присутствии 125 см 3 дихлорметана. Смесь подщелачивают до рН 11 путем медленного добавления водного раствора щелочи натрия 2151. После отстаиват-шя водную фазу экстрагируют 2 раза с дихлорметаном. Собранные органические фазы промывают водой с содой, затем сушат на сульфате магния. После фильтрации, испарения растворителя и рекристаллизации получен-итого продукта в 80 см 3 ацетонитрила получают, с выходом 23, 5,4 г правоврашающего изомера зопиклона с температу рой плавления 206,5 С, вращающая способность которого равна ай 135 3(с 1,0 ацетон).Маточные растворы от кристадшизации соли зопиклона с 1)-00-дибензоидвинной кислотой концентрируют досуха при пониженном давлении и получают 22,05 г соли, вращаю щая способность которой равна а 21 (с 0,2 ацетон).Полученную таким образом соль растворяют в 125 см 3 воды в присутствии 125 см 3 дихлорметана. Смесь подщелачивают до рН 11 путем медленного добавления водного раствора щелочи натрия 2 Ы. После отстаивания водную фазу экстрагируют 2 раза дихлорметаном. Собранные органические фазы промывают водой, затем сушат на сульфате магния.После фильтрации и испарения растворителя полученный кристаллизованный продукт 8.45 г перекристаллизовывают последовательно в 100,50 и 45 см 3 ацетонитрила. Таким образом получают, с выходом 13,9 96, 3,13 т левовращающего изомера зопиклона с температурой плав ления 206,9 С, вращающая способность которого равна а 138 Ь 3(е 10 ацетон).Обычным методом готовят таблетки с дозой 3 г активного продукта, имеющие следующий составОПИСАНИЕ ТЕСТОВ. 1. Пероральная токсичность на мышах В тесте определяют максимальную дозу соединения, которая при пероральном введении мышам, вызывают гибель 50 мышей. Исследуют от 2 до 4 дозировок, используя по 5 мышей на каждую из дозировок. 2. Средство к центральным бензодиазепиновым участкам рецептора 3 Этот метод основан на данных, полученных Сквайерсом и Брэструпом (Зцийгез и втаезтшр, Ыатпге, 1977, 266, 732-734). Он состоит в измерении, в присутствии исследуемого соединения, специфической фиксации лиганда с бензодиазепиновыми рецепторами, а именно с тритированным флунитразепамом. Если исследуемое соединение обладает аффинностью к сайтам бензодиазепинового рецептора, специфическая фиксация лиганда снижается. Эксперимент проводят указанным ниже способом. промытый гомогенат всей коры головного мозга самца крысы (СВ, СОВЗ, С 11 аг 1 е Кйуег,Франция) смешивают с Трис-НС 1 буфером (50 мМ) при рН 7,4, так чтобы конечная концентрация белка в смеси составляла 0,1 мг на см 3. Добавляют исследуемое соединение в разных концентрациях и тритированный флунитразепам (до конечной концентрации 1,5 нм). В присутствии диазепама (10 мкм) определяют неспецифическую фиксацию. После 120 минут инкубации при 0 С фильтруют каждый образец через стекловолоконный фильтр (фильтр Ватман СЭР/В) и на жидкостном сцинтилляционном счетчике определяют уровень радиоактивности, задержанной на фильтре. Таким образом определяют ИК 5 о т.е. концентрацию исследуемого соединения, которая ишибирует на 50 специфическую фиксацию лиганда. 3. Антагонистическая активность в отношении судорог, вызванных у мышей пентетразолом Использованный метод основан на данных работы Эверетга и Рихардса (Еуегеп и Шсьагдв, 1.Р 1 каппасо 1., 1944, 81, 402). Самцов или самок мышей (св СОВБ, С 1 тат 1 ез Шуег,аеФранция), весом от 20 до 24 г каждая, помещают отдельно после подкожной инъекции пендтетразола, в клетки, разделенные на 15 отсеков по 13 см 3 каждый, и накрывают их прозрачтиной накидкой из родоида. Мышей наблюдают в течение 30 минут. Считается, что у мыши удалось предупредить возникновение судорог, если в течение указанного периода в 30 минут не отмечается возникновения судорог (тонических или клинических). Пентетразол вводят в дозе 150 мг/кг в 25 см 3 физиологического раствора. Исследуемое соединение вводят перорально за 45 минут до начала наблюдения. Для исследования воздействия каждой дозы используют по 5 мышей. Далее вычисляют Эддд исследуемого соединения, которое представляет собой ту дозу, которая, оказывая наибольший эффект, подавляет судороги, вызванные пентетразолом у 50 исследуемых хшвотньпк. 4. Активность у мышей в тесте на выпрямительный рефлекс Принцип метода состоит в изучении влияния соединения на естественный выпрямительный рефлекс. Используют самцов или самок мышей (СВ 1, СОВЗ, Спапеэ Шуег, Франшипя) весом от 18 до 24 г каждая. Носитель (контроль) или исследуемое соединение вводят перорально (50 см 3/кг) на минуту с перед началом периода наблюдения на каждую исследуемую дозу используют по 5 животных. Каэкдого экивотною аккуратно кладут на спину и считают его неспособным выполнить выпрямительный рефлекс, если оно не принимает вертикальное положение в течение 20 секунд. вычисляют значение ЭД 5 т.е. ту дозу соединения, которая вызывает потерю выпрямительного рефлекса у 50 исследованных мышей. Результаты биологических исследований приведены в таблице.