Вакцина против пастереллеза птиц

(12) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ ВАКЦИНА ПРОТИВ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА ПТИЦ(71) Заявители Шимко Владимир Владимирович Скибо Вадим Никодимович Бирман Борис Яковлевич Андросик Николай Николаевич(72) Авторы Шимко Владимир Владимирович Скибо Вадим Никодимович Бирман Борис Яковлевич Андросик Николай Николаевич(73) Патентообладатели Шимко Владимир Владимирович Скибо Вадим Никодимович Бирман Борис Яковлевич Андросик Николай Николаевич(57) Вакцина против пастереллеза птиц, включающая формалинизированную суспензию бактерий родаи адъювант, отличающаяся тем, что содержит суспензию свежевыделенных из патологического материала птиц неблагополучных по пастереллезу птицеводческих хозяйств бактерий вида, предпочтительно серотипов А 1 и/или А 3, и/или А 4, концентрации 0,7109-1,3109 микробных кл/мл, а в качестве адъюванта содержит алюминия гидрат окиси коллоидный, 6 -ный, или масляный адъювант при следующем соотношении компонентов, мл/л формалинизированная суспензия бактерий вида 968-972 адъювант 13-47.(56) Ветеринарные препараты / Под ред. Д.Ф.Осидзе. - Мн. Колос, 1981. - С. 243-247. 0694560 2, 1996.0668779 1, 1995.5587166 , 1996. Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для лечения и профилактики пастереллеза индеек, кур и др. птицы. Известны и применяются в птицеводстве сухие вакцины против пастереллеза водоплавающих птиц из штаммов АВ и К Краснодарской НИВС и сухая авирулентная вакцина против пастереллеза птиц из пастеровского штамма 1. При изготовлении этих вакцин используются производственные штаммы пастерелл, которые обладают недостаточной иммуногенной активностью из-за многочисленных пассажей на искусственных питательных средах. Задачей настоящего изобретения является повышение иммуногенных свойств вакцины. Поставленная задача достигается тем, что вакцина против пастереллеза птиц, включающая формалинизированную суспензию микроорганизмов родаи адъювант,4966 1 в качестве антигена содержит свежевыделенные из патологического материала птиц неблагополучных по пастереллезу хозяйств культуры микроорганизмов видовпреимущественно серотипов А 1 и/или 3, и/или А 4, а в качестве адъюванта алюминия гидрат окиси коллоидный или масляный адъювант при следующем соотношении компонентов, мл/л формалинизированная суспензия свежевыделенных из патологического материала птиц неблагополучных по пастереллезу хозяйств культур микроорганизмов видов, 0,7109-1,3109 микробных кл/л 968-972 адъювант 13-47. По данным литературы 2, 3 и нашим собственным при исследовании патматериала из хозяйств, где имело место заболевание птицы с клиникой характерной для пастереллеза, как правило, выделяется в моноинфекции или в ассоциации .серотипов А 1, 3 и А 4. Предложенную вакцину производят следующим образом. В качестве патматериала для выделения микроорганизмов используют легкие, бронхиальные лимфоузлы, сердце, почки, печень, селезенка и костный мозг от павших или вынужденно убитой птицы из неблагополучных по пастереллезу хозяйств. Бактериологические исследования по выделению пастерелл проводят по общепринятым методикам. Первичные бактериологические посевы и дифференциацию пастерелл проводили согласно Краткого определителя бактерий Берги / Под ред. Хоулта. - М.,1980, Методических рекомендаций по диагностике пастереллезов сельскохозяйственных животных, 1987 и Методических указаний по лабораторной диагностике пастереллезов и птиц, 1992. Пригодной для изготовления вакцины является культура пастерелл, выделенная из двух и более паренхиматозных органов (в это число входит и костный мозг). Для накопления микробной массы свежевыделенные и идентифицированные культуры микроорганизмов видовпересевают на мясопептонный бульон (МПБ) на переваре Хоттингера, который готовят по общепринятой методике. Указанные выше культуры микроорганизмов пересевают на МПБ на переваре Хоттингера в пробирках (5 мл) по количеству матр и инкубируют в термостате при температуре 36,5-37,5 С в течение 18-20 ч. После инкубации бульонную культуру засевают на МПА на переваре Хоттингера в биологические флаконы (матры) емкостью из расчета 1 пробирка бульонной культуры на матру. Мясопептонный агар готовят не переваре Хоттингера по общепринятой методике. Разливают расплавленный агар в биологические флаконы (матры) емкостью 1,5 л, из расчета 260 ил агара на флакон. Культуру на МПА в матрах выращивают термостате при температуре 36,5-37,5 С в течение 18 ч. Затем культуру смывают с агара 50 мл физиологического раствора на одну матру. Смытую культуры .серотипов А 1, 3 или А 4 сливают со всех флаконов в одну стерильную емкость перемешивают определяют концентрацию бактерий по оптическому стандарту мутности ГИСК им. Л.А. Тарасевича. Контроль чистоты культуры проводят микроскопически. Культура должна быть однородной, не содержать посторонней микрофлоры. После определения оптической плотности концентрацию выделенного вида бактерий доводят физиологическим раствором до 0,7 - 1,3 0 млрд. микробных тел в одном мл. Для инактивации добавляют формалин в количестве 0,5 к конечному объему. Перед инактивацией формалин разводят в два раза физиологическим раствором. После тщательного взбалтывания взвесь выдерживают в термостате при 37 С в течение 24 ч, а при комнатной температуре 3 суток с периодическим помешиванием. Полноту инактивации определяют путем посева на МПБ и МПА в соответствии с ГОСТ 28085-89 Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности. 4966 1 Затем к полученной формалинизированной суспензии микроорганизмов добавляют в качестве адъюванта алюминия гидрат окиси коллоидный (гидроксал) (ГОСТ 18287-81) в виде 6 -ного раствора или масляный адъювант. Рабочий раствор гидроксала перед использованием стерилизуют автоклавированием при давлении 2 атм в течение 30 мин. Полученную вакцину проверяют на стерильность и безвредность. Полученная вакцина предназначена для лечения и профилактики пастереллеза птиц,преимущественно вызванногосеротипами А 1, 3 или А 4. Вакцину применяют птице внутримышечно в крыло между лучевой и локтевой костями в дозе 1 мл с соблюдением правил асептики и антисептики. Иммунитет наступает через 5-7 дней. Предложенная вакцина была испытана в апреле и мае 1998 г. на Молодечненской птицефабрике. В апреле было привито 200 голов индейки в возрасте 50 дней, а в мае 6200 голов в возрасте 45 дней. В первом случае сохранность молодняка составила 100 ,во втором - 95,6 . Таким образом, результаты опытов показывают, что вакцина против пастереллеза птиц обладает выраженным противоэпизоотическим эффектом и может быть использована для повышения сохранности молодняка птицы (акты прилагаются). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.