Способ оценки выделительной функции кожи

(51) МПК (2006) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОЦЕНКИ ВЫДЕЛИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ КОЖИ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(72) Автор Улащик Владимир Сергеевич(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физиологии Национальной академии наук Беларуси(57) Способ оценки выделительной функции кожи, заключающийся в том, что на обезжиренную поверхность кожи накладывают и фиксируют на 2-2,5 часа химически чистую хроматографическую бумагу, затем бумагу снимают, разделяют на две части и оценивают выделительную функцию кожи по количеству и удельной активности потовых и сальных желез, при этом одну часть бумаги обрабатывают 1 -ным раствором нингидрина, ополаскивают разбавленным раствором ацетона, высушивают и подсчитывают на ней количество красно-коричневых точек, соответствующее количеству активных потовых желез,затем нингидрин элюируют с бумаги 10 -ным раствором ацетона, определяют интенсивность окраски полученного элюата и по калибровочной кривой рассчитывают в нем содержание аминокислот, после чего по отношению содержания аминокислот в элюате к количеству активных потовых желез рассчитывают удельную активность потовых желез,а вторую часть бумаги обрабатывают в насыщенном растворе судана черного, дважды отмывают 60 -ным этиловым спиртом, высушивают и подсчитывают на ней количество черных и темно-синих точек, соответствующее количеству активных сальных желез, затем судан черный элюируют с бумаги 20 -ной уксусной кислотой, определяют интенсивность окраски полученного элюата и по калибровочной кривой рассчитывают в нем содержание липидов, после чего по отношению содержания липидов в элюате к количеству активных сальных желез рассчитывают удельную активность сальных желез. Изобретение относится к медицине, к разделу функциональной диагностики, и касается оценки функций кожных желез. Заявителю неизвестен комплексный способ исследования функциональной активности потовых и сальных желез по анализу их секрета, в силу чего не может быть указан объект,являющийся наиболее близким аналогом заявляемого способа. 11489 1 2008.12.30 Задачей заявляемого изобретения является создание способа оценки выделительной функции кожи, который позволяет одновременно изучать как общую, так и удельную активность потовых и сальных желез за счет раздельного определения количества химических веществ, характерных для их деятельности. Поставленная задача достигается тем, что предложен способ оценки выделительной функции кожи, заключающийся в том, что на обезжиренную поверхность кожи накладывают и фиксируют на 2-2,5 часа химически чистую хроматографическую бумагу, затем бумагу снимают, разделяют на две части и оценивают выделительную функцию кожи по количеству и удельной активности потовых и сальных желез, при этом одну часть бумаги обрабатывают 1 -ным раствором нингидрина, ополаскивают разбавленным раствором ацетона, высушивают и подсчитывают на ней количество красно-коричневых точек, соответствующее числу активных потовых желез рассчитывают удельную активность потовых жедез, затем нингидрин элюируют с бумаги 10 -ным раствором ацетона, определяют интенсивность окраски полученного элюата и по калибровочной кривой рассчитывают в нем содержание аминокислот, после чего по отношению содержания аминокислот в элюате к количеству активных потовых желез, а вторую часть бумаги обрабатывают в насыщенном растворе судана черного, дважды отмывают 60 -ным этиловым спиртом, высушивают и подсчитывают на ней количество черных и темно-синих точек, соответствующее количеству активных сальных желез, затем судан черный элюируют с бумаги 20 -ной уксусной кислотой, определяют интенсивность окраски полученного элюата и по калибровочной кривой рассчитывают в нем содержание липидов, после чего по отношению содержания липидов в элюате к количеству активных сальных желез рассчитывают удельную активность сальных желез. Пример На предварительно тщательно обработанную спиртовым раствором кожную поверхность в области предплечья (или в другой интересующей области тела) накладывают с помощью стерильного пинцета тщательно обезжиренную химически чистую хроматографическую бумагу площадью 4 см 2, покрывают перфорированным целлофаном и фиксируют на руке лейкопластырем, скотчем или другим способом. Время аппликации зависит от поставленной цели, в обычных исследованиях 2-2,5 часа. Затем хроматографическую бумагу снимают с поверхности кожи пинцетом и разрезают на две бумажки площадью по 2 см 2 каждая. Одна из бумажек помещается в пробирку с раствором судана, где может находиться от 2 часов до суток. После окраски бумажку дважды отмывают 60 -ным этиловым спиртом и высушивают. После этого на бумажке подсчитывают количество черных(темно-синих) точек на светло-синем общем фоне бумажки, соответствующих числу функционировавших в исследуемом периоде потовых желез. Затем эту же бумажку разрезают на более мелкие кусочки, которые помещают в плотно закрывающуюся пробирку и заливают 20 -ной уксусной кислотой. Элюат калориметрируют на фотокалориметре или спектрофотометре и по калибровочной кривой показатели экстинции переводят в абсолютные величины (мг/см 2). Путем деления определенного количества липидов на число сальных желез устанавливают удельную активность этих кожных желез. Вторую хроматографическую бумажку параллельно помещают на 2 часа в пробирку с 1 -ным водным раствором нингидрина. После окраски бумажку ополаскивают в разбавленном растворе ацетона, сушат и на ней с помощью лупы определяют количество фиолетово-розовых точек на бледно-розовом фоне, которое соответствует числу активных потовых желез. Затем эту же бумажку разрезают на более мелкие части, помещают в пробирку с притертой пробкой и заливают 10 -ным раствором ацетона. Через 1 час элюат калориметрируют на фотоэлектрокалориметре или спектрофотометре и по калибровочной кривой показатели экстинции прибора переводят в абсолютные величины (мг/см 2). Делением общего содержания аминокислот на число потовых желез вычисляют удельную активность потовых желез. 2 11489 1 2008.12.30 Заявляемый способ дает хорошую воспроизводимость получаемых результатов колебания в параллельных определениях активности сальных желез не превышают 0,5 , а потовых желез - 1 . Достоинством предлагаемого изобретения является то, что метод легко может быть трансформирован для определения любых других компонентов пота(например хлоридов, кальция, углеводов и др.) или кожного сала (жирные кислоты, гормоны и др.), что весьма важно для различных областей медицины. Заявляемый способ может быть использован для изучения состояния кожи, в частности ее выделительной функции, при действии различных физических факторов, применяемых с лечебно-профилактическими и реабилитационными целями. Для иллюстрации приводим некоторые результаты, полученные нами при изучении с помощью заявляемого способа действия различных физиотерапевтических методик на функциональное состояние потовых и сальных желез (таблица). Полученные данные сравнивались с результатами исследований других авторов, применявших иные исследовательские методы, и дали хорошее с ними совпадение. Влияние физических факторов на деятельность потовых и сальных желез Действующий фактор Потовые железы Сальные железы Экскреция Число активных Секреция липи- Число активных аминокислот,желез дов, мкг/см 2 желез мкг/см 2 20,11,8 282,1 62,41,2 151,0 Контроль Гальванизация,26,41,4 361,4 67,14,2 161,2 0,05 мА/см 2 Электрофорез 57,53,8 482,0 52,03,6 180,8 пилокарпина Ультразвук,33,72,0 341,1 82,54,1 261,6 0,6 Вт/см 2 Таким образом, достигаемый технический результат заявляемого изобретения заключается в том, что предложен простой и доступный способ исследования состояния кожных желез, который позволяет одновременно изучать как общую, так и удельную активность потовых и сальных желез человека. Способ найдет применение в дерматологии, неврологии, физиотерапии, курортологии и функциональной диагностике 1, 3. Источники информации 1. Кожа (строение, функции, общая патология и терапия) / Под ред. А.М. Чернуха и Е.П. Фролова. - М., 1982. 2. Трубицина Г.А. Потоотделение у человека в покое и при мышечной деятельности. Л., 1968. 3. Слынько П.П. Потоотделение и проницаемость кожи. - Киев, 1973. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3