Способ получения макролидных соединений

011 - гидроксильная группа или защищенная гидроксильная группа, подвергают взаимодействию с соединением формулы П 1К, ОЫНд, где Е - водород или низший атолл, с последующим выделением целевого продукта формулы 1, где К 2- ниэцшй алкил и 0113 - шдроксильная группа, или, когда вьщелятот соединение формулы 1, где ОН - заишщенная гидроксильная группа, снимают защитную группу и выделяют соединение формулы 1, где ОКЗ ггщроксильная группа, или, в случае необходимости,соединение формулы 1, где К - водород или 011 - защищенная гидроксшхьная груш-га, под вергают простой этерификации галогенидом формулы К 1 У, где У - галоген, а К 1 низший алкил, с последующим снятием защиты с гидроксильной группы.Изобретение относится к способу получения новых макролидных соединений - антибиотиков формулы 1где К представляет собой метил, этил или изопропил группыОК 3 представляет собой гидроксильную группу, и группа-МОЮ находится в Еконфигурации.Известно получение антибиотиков -3-541, которые являются макролидными соединениямиЦель изобретет/ш - получение новых макролидных соединений, обладающих более высокой противогельминтной и гшсектицидной активностью, , .Способ получениясоединенищ характеризуемых формулой 1,закдючается в том, что соединенищ-характеризуемые формулой Пгде Ю имеют указанные значения ОН - гидроксильная группа, незащищенная или защи щенная, подвергают взаимодействию с соединением формулы Н 2 ЪЮК 1 (где 112 есть как было указано выше) и, в случае необходимости, с последующим снятием защиты для соединения,характеризуемого формулой 1, в котором 0113 представляет собойзацдпценнуто гидроксильную группу, И, в случае необходимости, соединение формулы 1, гдеК 1 - атом водорода и-ОКЗ - защищенная гидроксильная группа, подвергают простой этерификашш гапогенидом формулы Ку, где у - атом галогена, а 112 - низшшй адпсил, с последующим снятием защиты с гидроксильной группой. . уРеакция оксимирования может быть осуществлена в водной или безводной реакционной среде, обычно при температурах в диапазоне от -2 О до 1 ООС т.е. например от -10 до 50 С.Растворителями, которые могут быть использованы, являются вода и смешивающиеся с водой растворители, такие, как спирты, например метанол или этанол, ашщы, также, как, нач пример, ЪДЫ-диметилформамид, МДЧ- диметилацетамид или гексаметилфосфорамид, простые эфиры, такие, как простые циклические эфиры, те. тетрагидрофуран или диоксан и ациловые простые эфиры, такие, как диметоксиэтан или простой. диэтиловыйэфир, нитрилы, такте,как, например, ацетонитрил, сульфоны, такие, как,например, сульфолан углеводороды, такие, как, например, галогенироваъшые углеводороды, т.е.например метиленхлторид и слоисньте эфиры, такие, как этилацетат, а также смеси, состоящие 1 из двух и более таких растворителей.В тех случаях, когда используется водная среда для проведения креакции, то реакционная среда обычно-может быть буферирована с помощью соответствующей кислоты, основания или буферного раствора до величины водородного показателя, равного о.т 2 до 9 ед. трН. . .К пригодным кислотам относятся минеральные шаслоты, такие, как хлористоводородная гсислота или серная кислота, и-карбоновая кислота, такая, как, например, уксусная кислота. Пригодными основаниями являются карбонаты и бикарбонаты щелочных металлов, такие, как бикарбонат натрия гидроокиси, такие, как, Например, гидроокись натрия и карбоксилаты щелочных металлов, такие, как, например, ацетат натрия пригодным буферным раствором является раствор, состоящий из ацетата натрия и уксусной кислоты.Соединения формулы П являются либо известными соединениями, которые указаны в Патснтной заявке Великобритании Не 2176182 (заявка в СССР М 24 О 27456.7), или могут быть получены из известных соединений, описываемых в описании с использованием стандартных процедур. 1Реакция этерификации может быть осуществлена с использованием реагента, характеризуемого формулой Еду, где 112 есть, как было указа-но. выше, а У-группу, такую, как хлор, бром или йод. . ,Изобретение иллюстрируется следующими примерами и приготовлениями (температуры указаны в С, Ь означает литр и ЕКОН означает этанол).В приводимых примерах и приготовлениях соединения поименованы как производные известных факторов, факторов А, В, С И В. Фактор А представляет собой соединениерхаракте 3ризуемое формулой (71), в котором К представляет собой изопропил, а 113 представляет собой водород фактор В представляет собой соединение, характеризуемое формулой (И), в котором 111 представляет собой метил и 113 представляет собой метшт фактор С представляет собой соединение, характеризуемое формулой (И), в котором 111 представляет собой метил и Кэ представляет собой водород и фактор В представляет собой соединение, характеризуемое формулой (И), в котором Ю представляет собой этил и 113 представляет собой водород.Приготовление 1-5-кето Фактора А. Споры ЫС 1 В 12015 были инокулированы на скошенньпй агар, изготовленный из следующих компонентовДистиллированная вода объемом до 1 л (водородный показатель равен 5,4 ед. рН) подвергалась инокулированию при температуре 28 С в течение 10 дней.Созревщая культура на скошенном агаре далее покрывалась 6 мл 10 раствора глицеринового раствора и затем защищалась стерильным инструментом с тем, чтобы разрыхлить споры и мицелий. Аликвотные доли объемом 0,4 мл полученной суспензии спор переносились в стерильные полипропиленовые пробирки, которые затем заваривались (запаивались) и хранились в атмосфере паров жидкого азота до тех пор, пока не возникала необходимость в их использовании.Две колбы Эрленмейера емкостью 250 мл, содержащие 50 мл засеянной среды, были приготовлены следующим образомгл 1 Д-глюкоза 15,0 Глицерин 15 Пептон сои 15 Хлорид натрия 3,0 Углекислый кальций 1,0 Дистиллированная вода до 1 л.(Величина водородного показателя среды первоначально была равна 6,7 ед. рН, которая затем доводилась до 7,0 ед. рН с помощью водного раствора гидроокиси натрия перед обработкой в автоклаве. Величина водородного показателя среды после обработки в автоклаве была равна 7,3 ед. рН). Каждая из колб подвергалась инокулированию с помощью 0,2 мл суспензии спор, взятой из пробирок.Далее колбы подвергались инкубации при температуре 28 С в течение 3 дней в шейкере, вращающемся со скоростью 250 об/мин (с диаметром орбитального вращения, равным 50 мм).Содержание обеих колб было использовано для инокулирования ферментационной емкости(объемом 70 л), содержащей 40 л той же самой среды, с добавлением полипропилена 2000(0,06 объема/объемньш). Полипропилен 2000 был добавлен, как это необходимо при проведении процесса ферментации, для контроля Ценообразования. Процесс ферментации проводился при температуре 28 С при перемешивании и аэрации, достаточных для того, чтобы обеспечить поддержание уровня растворенного щслорода выше, чем 30 насыщения. Спустя 24 ч-ферментации, порция бульона емкостью 9 л была загружена в ферментер объемом 700 л,содержащий 450 л среды, полученной следующим образомПеред стерилизацией величина водородного показателя доводилась до 6,5 ед. рН.Процесс ферментации проводился при температуре 28 С при перемешивании и аэрации. Противовспенивающий препарат - полипропилен 2000 добавлялся в соответствии с требованиями, и величина водородного показателя снижалась до 7,2 ед. рН путем добавления раствора серной кислоты до тех пор, пока не происходило созревание культуры. Ферментация с созреванием культуры произошла через 5 дней.Бульон в количестве 450 л был подвергнут осветлению в центрифуге типа Вестфалия КА 25, и остаточный, образующийся сверху в результате отстаивания материал заменялся водой в объеме 20 л. Извлеченный клеточный материал в количестве 25,5 г подвергался перемешиванию в течение 1 ч в смесителе типа Силъверсон, модель ВХ с использованием остаточного количества этанола с получением в результате материала общимобъемом- 75 л.Полученная суспензия подвергалась фильтрации, и твердый остаток Еповторно экстрагировался.метанолом в количестве 35 л и фильтровался. Объединенный фильтрат в количестве 87 л раз бавлялся водой в количестве 40 л и экстрагировался далее петролейным эфиром в количестве 30 л, имеющим температуру б 0-80 С. Спустя 30 мин, фазы разделялись на центрифуге типа Вестфалия МЕМ 1256 и нижняя метанольная фаза подвергалась повторному экстрагирова нию, петролейным эфиром в количестве 30 литров, имеющим температуру 60-80 С, после до- .бавления воды в количестве 40 л. После разделения нижняя фаза повторно подвергалась экстрагированию петролейным эфиром в количестве 30 л, имеющим температуру б 0-80 С. Объединенные фазы петролейного эфира объемом 85 л подвергались концентрированию путем трехкратного пропускания через вьгпариватель. пленочного типа фирмы Пфаудер 8.8-127-27(давление паров 0,1 бара, температурапаров 20 С, температура пара 127 С). Концентрат в объеме 9 л подвергался сушке с использованием сульфата натрия в количестве 2 кг, и далее подвертелся концентрированию при пониженном давлении при температуре 40 С с помощью вращающегося пленочного выпаривателя. у Маслообразный остаток в количестве 130 г подвергался растворению в хлороформе с получением материала в объеме 190 мл, который затем пропускался через колонку типа Морск 7734, заполненную двуокисью кремния - 60,(200 х 4 см), размещенной в хлороформе. Колонка подвергалась промыванию хлороформом (500 мл), и далее производилось. элюирование смесью, состоящей из хлороформа и этилацетата (31), и фракции сдпримерным объемом, равным 40 мл, собирались после отбора предшествующего объема, равного 1400 мл.Фракции Нем 32-46 подвергались смешиванию и выпдриваиию с получением в результате масла в количестве 21,2 г. Фракции Мама 47-93 подвергалисьсмешению и выпаривались с получением в результате масла в количестве 20,1 г, которое подвергалось растворению в смеси, состоящей из хлороформа и этилацетата (в соотношении 31) до объема, равного 50 мл. Этасмесь затем вводилась в колонку типа Мерси 7734, заполненную двуокисью кремния - 60(200 х 4 см), находящейся в смеси, состоящей из хлороформа и этилацетата в соотношении 31, и фракции с примерным объемом, равным 40 мл, собирались после предшествующего отбора фракций в количестве 1,400 мл. Фракции Мг 22-36 соединялись и подвергались выпаривают с