Способ оценки качества спермы

(12) НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА СПЕРМЫ(71) Заявитель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Шейко Иван Павлович Горбунов Юрий Анатольевич Жаркин Владимир Васильевич Мордань Геннадий Генрикович(73) Патентообладатель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(57) Способ оценки качества спермы, включающий смешивание спермы с питательной средой и последующий анализ поврежденных акросом сперматозоидов под микроскопом,отличающийся тем, что анализ осуществляют под микроскопом с темнопольным конденсором, в качестве питательной среды используют жидкую фракцию куриного яйца с коэффициентом рефракции 1,3568-1,3590, смешивают сперму с питательной средой в соотношении 13, подсчитывают число подвижных сперматозоидов с неповрежденными акросомами, число подвижных сперматозоидов с поврежденными акросомами и число совсем неподвижных сперматозоидов в 10-15 контрольных полях зрения микроскопа, суммируют аналогичные показатели и вычисляют их соотношение, при этом полноценной считают сперму при наличии в ней более 50 подвижных сперматозоидов с неповрежденными акросомами, по сравнению с суммарным числом подвижных сперматозоидов с поврежденными акросомами и совсем неподвижных сперматозоидов.(56)1329780 1, 1998.1261647 1, 1986.1575931 3, 1990.2099024 1, 1997.5474890, 1995. Соколовская И. и др. Животноводство. - 1981. -9. - С. 46-47. Изобретение относится к животноводству, в частности к морфологическим способам оценки спермы по целостности акросом. Известен способ определения качества спермиев, который включает смешивание спермы с питательной средой, содержащей флуорохром, и последующий анализ окрашенных спермиев под микроскопом. В качестве флуорохрома используют смесь двух красителей - тиазинового красного и этидиум бромида. При повреждениях мембраны акросомы тиазиновый красный проникает в акросому и вызывает ее свечение, а этидиум бромид,5946 1 проникая через поврежденную цитоплазматическую мембрану спермия, вызывает свечение его головки. О качестве спермиев судят по интенсивности их свечения под люминисцентным микроскопом ( 1329780 А 1, 1986). Однако данный способ слишком сложен в исполнении и неприемлем для оценки спермы в производственных условиях, а также - не дает возможности проводить оценку состояния акросом на подвижных спермиях. Задача изобретения - повышение точности оценки качества спермиев простым и доступным способом. Поставленная задача решается способом оценки качества спермы, включающим смешивание спермы с питательной средой и последующий анализ поврежденных акросом сперматозоидов под микроскопом, причем анализ осуществляют под микроскопом с темнопольным конденсором, в качестве питательной среды используют жидкую фракцию куриного яйца с коэффициентом рефракции 1,3568-1,3590, смешивают сперму с питательной средой в соотношении 13, подсчитывают число подвижных сперматозоидов с неповрежденными акросомами, число подвижных сперматозоидов с поврежденными акросомами и число совсем неподвижных сперматозоидов в 10-15 контрольных полях зрения микроскопа,суммируют аналогичные показатели и вычисляют их соотношение, при этом полноценной считают сперму при наличии в ней более 50 подвижных сперматозоидов с неповрежденными акросомами, по сравнению с суммарным числом подвижных сперматозоидов с поврежденными акросомами и совсем неподвижных сперматозоидов. В процессе взятия семени у самцов-производителей, транспортировке, замораживания и размораживания спермы часто повреждается наиболее ценная, но довольно нежная по структуре, часть сперматозоида (Соколовская И. и др. Животноводство. - 1981. -9. - С. 4647.). Поэтому перед использованием оттаянной спермы необходимо убедиться в ее качестве и пригодности к осеменению самок животных. Способ осуществляют следующим образом. Вскрывают диетическое куриное яйцо, пипеткой отсасывают жидкую часть белка, на рефрактометре определяют его коэффициент рефракции, который, как правило, находится в пределах 1,3568-1,3590. Затем на предметное стекло наносят некоторое количество данного белка, куда добавляют размороженную сперму в три раза меньшего объема, осторожно перемешивают, накрывают покровным стеклом, помещают под микроскоп с темнопольным конденсором и в 10-15 контрольных полях зрения подсчитывают количество подвижных спермиев с неповрежденными акросомами и с поврежденными акросомами, а также отдельно совсем неподвижных сперматозоидов. После суммирования отдельно взятых данных показателей устанавливают их соотношение. Полноценной спермой считают такую, где подвижных спермиев с неповрежденными акросомами выявлено большее количество, чем сумма подвижных спермиев с поврежденными акросомами и совсем неподвижных спермиев, на 50 и более. Таким образом, использование предложенного способа позволяет замедлить движение сперматозоидов в разбавленной белком куриного яйца сперме самцов-производителей,установить их биологическую полноценность по хорошо различимой неповрежденной акросоме и установить соотношение количества полноценных и неполноценных половых клеток в семени, предназначенном для искусственного оплодотворения самок. Данный способ позволяет повысить точность оценки качества спермы самцов животных сравнительно простым и дешевым способом, сократить расход полноценного семени самцовпроизводителей ценных пород животных. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 2