Стерильный апирогенный раствор для инъекций противоопухолевого действия, содержащий физиологически приемлемую соль гликозида антрациклина

61 9/08 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ СТЕРИЛЬНЫЙ АПИРОГЕННЫЙ РАСТВОР ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ, СОДЕРЖАЩИЙ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМУЮ СОЛЬ ГЛИКОЗИДА АНТРАЦИКЛИНА(71) Заявитель ФАРМИТАЛИЯ КАРЛО ЭРБА С.П.А.(73) Патентообладатель ФАРМИТАЛИА КАРЛО ЭРБА С.П.А.(57) 1. Стерильный апирогенный раствор для инъекций противоопухолевого действия, заключенный в герметичной емкости, включающий 0,1-50 мг/мл физиологически приемлемой соли гликозида антрациклина, отличающийся тем, что он дополнительно содержит физиологически приемлемую кислоту в количестве, достаточном для создания рН раствора 2,5-5,0. 2. Раствор по п. 1, отличающийся тем, что он имеет рН 2,62-3,14. 3. Раствор по п. 1, отличающийся тем, что рН раствора равно 3. 4. Раствор по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что физиологически приемлемая кислота представляет собой неорганическую или органическую кислоту. 5. Раствор по п. 4, отличающийся тем, что кислота представляет собой хлористоводордную, серную,фосфорную, уксусную, янтарную, винную, аскорбиновую, лимонную, глутаминовую, метилсульфокислоту или этилсульфокислоту. 6. Раствор по п. 5, отличающийся тем, что кислота представляет собой хлористоводородную кислоту. 7. Раствор по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что антрациклиновым гликозидом является доксорубицин, 4-эпидоксорубицин, 4-дезокси-4-иодо-доксорубицин, даунорубицин или 4-деметоксидаунорубицин. 8. Раствор по п. 7, отличающийся тем, что гликозид антрациклина представляет собой доксорубицин. 9. Раствор по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что физиологически приемлемой солью гликозида антрациклина является хлоргидрат. 10. Раствор по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что растворителем является вода или смесь ее с одним или несколькими соединениями, выбранными из группы, включающей этанол, полиэтиленгликоль и диметилацетамид. 11. Раствор по пп. 1-9, отличающийся тем, что растворитель представляет собой физиологический солевой раствор. 12. Раствор по любому из пп. 1-11, отличающийся тем, что концентрация гликозида антрациклина составляет 1-20 мг/мл. 13. Раствор по п. 1, отличающийся тем, что гликозид антрациклина представляет собой доксорубицин, а концентрация его в растворе равна 2-20 мг/мл. 14. Раствор по п. 13, отличающийся тем, что концентрация доксорубицина составляет 2-5 мг/мл. 15. Раствор по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что дополнительно содержит один или несколько компонентов, выбранных из числа сосолюбилизирующих агентов, агентов, регулирующих тоничность и консервантов. 2582 1 16. Раствор по п. 15, отличающийся тем, что агентами для регулирования тоничности являются декстроза, лактоза и маннит. Данное изобретение относится к стабильному готовому к использованию раствору, который может вводиться внутривенной инъекцией и содержит противоопухолевый антрациклиновый гикозид, например, доксорубицин, а также к получению этого раствора в герметизированном контейнере и к способу лечения опухолей с использованием указанного готового к употреблению раствора. Антрациклиновые гликозидные соединения являются хорошо известным классом соединений в антинеопластической группе агентов, и их типичным и наиболее широко используемым представителем является доксорубицин, см.,, 1981, .,, ,, , , 1974,. ,. ., , .,/ 1974,., .., . ,, В настоящее время антрациклиновые гликозидные противоопухолевые лекарства, в частности, например,доксорубицин, доступны только в форме лиофилизованных препаратов, которые нужно разводить перед введением. Как производство, так и разбавление таких препаратов подвергают участвующий в этих операциях персонал (рабочих, фармацевтов, медицинский персонал, медсестер) риску отравления, который особенно серьезен из-за токсичности противоопухолевых соединений. Действительно, в левой колонке на стр. 175 в 28, описаны вредные эффекты антинеопластических лекарств и рекомендуется Обращаться с ними с большой осторожностью,избегая контакта с кожей и глазами их не следует вдыхать. Следует принять меры предосторожности для того, чтобы избежать экстравазации, так как может возникнуть боль и повреждение ткани. Аналогичным образом в . ., . 10(2), . 71-74 (1984) и в статьях в,4, 1983, . 488 и в ,7, 1983, п.89, описаны тяжелые поражения, наблюдавшиеся у медицинского персонала, подвергавшегося использованию цитостатических агентов, включая доксорубицин. Для введения лиофилизованного препарата требуется двойная операция с лекарством, а именно лиофилизованный материал сначала нужно развести, а затем ввести и, кроме того, в некоторых случаях полное растворение порошка может потребовать длительного встряхивания из-за трудности растворения. Риск, связанный с производством и разведением лиофилизованного препарата мог бы быть значительно снижен, если бы был доступен готовый к употреблению раствор лекарства. Мы разработали стабильный, терапевтически приемлемый раствор антрациклинового гликозида, например, доксорубицина, который может вводиться внутривенно инъекцией и его получение и введение не требует ни лиофилизации, ни разбавления. В соответствии с данным изобретением предлагается стерильный апирогенный раствор для инъекций противоопухолевого действия, заключенный в герметичную закрытую емкость, включающий 0,1-50 мг/мл физиологически приемлемой соли гликозида антрациклина, отличающийся тем, что он дополнительно содержит физиологически приемлемую кислоту в количестве, достаточном для созданияраствора 2,5-5,0. Антрациклиновый гликозид предпочтительно выбирают из группы, включающей в себя доксорубицин,4-эпи-доксорубицин (т.е. эпирубицин), 4-дезокси-4-йододоксорубицин, даунорубицин и 4 деметоксидаунорубицин (т.е. идарубицин). Особенно предпочтительным антрациклиновым гликозидом является доксорубицин. Любая физиологически приемлемая соль антрациклинового гликозида может быть использована для получения раствора по данному изобретению. Предпочтительно соль не в форме лиофилизола, который также содержит наполнитель. Примерами подходящих солей могут быть соли с минеральными неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, фосфорная, и т.п. и соли с некоторыми органическими кислотами, такими как янтарная, винная, аскорбиновая, лимонная, метансульфокислота, этансульфокислота и т.п. Соль, образованная с хлористоводородной кислотой, является особенно предпочтительной солью, особенно если антрациклиновый гликозид представляет собой доксорубицин. Можно использовать любой растворитель, который физиологически приемлем и способен растворять соль антрациклинового гликозида. Раствор по данному изобретению может также содержать один или больше дополнительный компонент, такой как сосолюбилизирующий агент (который может быть таким же,как растворитель), регулирующий изотоничность агент и консервант. Подходящие растворители и сосолюбилизирующие агенты могут быть, например, следующими вода,физиологический солевой раствор и смеси воды и одного или более (а) алифатического амида, например, ,2-диметилацетамида, -гидрокси-2-этиллактамид и т.п., (б) спирта, например, этанола, бензилового спирта и т.п., (в) гликолями полиспирта, например, пропиленгликоля, глицерин и т.п., (г) сложного эфира полиспирта, например, диацетина, триацетина и т.п., (д) полигликоля или простого полиэфира, например, полиэтиленгликоль 400, простой метиловый эфир пропиленгликоля и т.п., (е) диоксолана, например, изопропилиденглицерина и т.п., диметилизосорбида и (ж) пирролидонового производного, например, 2-пирролидона, -метил-2 пирролидона, поливинилпирролидон. Подходящие регулирующие тоничность агенты могут представлять собой, например, физиологически приемлемые неорганические хлориды, например, хлорид натрия, декстрозу, лактозу, маннит и т.п. Пригодные для физиологического введения консерванты могут представлять собой, например, сложные эфиры пара-гидроксибензойной кислоты (например, метиловый, этиловый, пропиловый, бутиловый эфиры или их смеси), хлоркрезол и т.п. Вышеупомянутые растворители и сосолюбилизирующие агенты, агенты, регулирующие тоничность и консерванты могут использоваться либо индивидуально, либо в виде смеси двух и более компонентов. Примерами предпочтительных растворителей являются вода, и смеси воды одного или более этанола, полиэтиленгликоля и диметилацетамида. Особенно предпочтительным растворителем является вода. Для доведенияв интервале от 2,5 до приблизительно 5,0 добавляют физиологически приемлемую кислоту. Кислота может представлять собой физиологически приемлемую кислоту, например, неорганическую минеральную кислоту, такую как хлористоводородная, серная, фосфорная, и т.п., либо органическую кислоту, такую как уксусная, янтарная, винная, аскорбиновая, лимонная, глутаминовая кислоты, метансульфокислота, этансульфокислота и т.п. Предпочтительный интервалготового к использованию раствора по данному изобретению равен 2,62-3,14,причем особенно предпочтительным значениемявляетсяприблизительно 3. В растворах по данному изобретению концентрация антрациклинового гликозида варьируется от 0,1 мг/мл до 50 мг/мл, предпочтительно от 1 до 20 мг/мл. Предпочтительные интервалы концентрации могут слабо различаться для различных антрациклиновых гликозидов. Так, например, предпочтительные концентрации для доксорубицина лежат в интервале приблизительно 2-50 мг/мл, предпочтительно 2-20 мг/мл, а особенно подходящие значения равны 2 мг/мл и 5 мг/мл. Аналогичные концентрации предпочтительны также для 4-эпи-доксорубицина и 4-дезокси-4 йододоксорубицин. Предпочтительные интервалы концентрации для даунорубицина и 4 деметоксидаунорубицина равны 1-20 мг/мл, а особенно подходящими являются концентрации 1 мг/мл и 5 мг/мл. Подходящей упаковкой для раствора антрациклинового гликозида могут быть любые известные контейнеры, предназначенные для парентерального использования, такие как пластиковые и стеклянные контейнеры,готовые к использованию шприцы и т.п. Предпочтительным контейнером является герметизированный стеклянный контейнер, например, пузырек или ампула. Растворы согласно изобретению получают способом, включающим в себя растворение физиологическиприемлемой соли антрациклинового гликозида, предпочтительно не имеющей формы лиофилизата, который также содержит наполнитель в физиологически приемлемом растворителе, добавление физиологически приемлемых кислот как единственных агентов для доведенияот 2,5 до 5,0 и пропускание полученного раствора через стерилизующий фильтр. Перед пропусканием раствора через стерилизующий фильтр к раствору может быть прибавлен один или больше дополнительный компонент, такой как сосолюбилизирующий агент, агент, регулирующий тоничность и консервант, например, относящийся к описанному выше типу. В растворах по данному изобретению можно получать композиции, имеющие очень высокую концентрацию антрациклинового гликозидного активного соединения, даже до 50 мг/мл и выше. Это является значительным преимуществом по сравнению с имеющимся в настоящее время препаратами, где высокие концентрации антрациклинового гликозида могут быть получены лишь с значительными трудностями,обусловленными трудностью солюбилизации при разведении, которое проводится в основном с помощью солевого раствора. Присутствие в лиофилизованном порошке фармацевтического инертного носителя, например, лактозы, и то, что его содержание, как правило, превышает содержание активного соединения и равно до 5 частей носителя на 1 часть активного соединения, оказывает отрицательное влияние на растворимость, в результате чегомогут возникать затруднения при растворении лиофилизованного препарата, особенно при получении концентраций антрациклинового гликозида, превышающих 2 мг/мл. Растворы по данному изобретению отличаются хорошей стабильностью. Было установлено, что растворы, полученные с различными растворителями, имеющие различныеи концентрации стабильны в течение значительного времени при температурах, используемых для хранения фармацевтических препаратов. Это иллюстрируется в представленных ниже примерах. Благодаря хорошо известной противоопухолевой активности антрациклиновых гликозидных активных лекарственных соединений фармацевтические композиции по данному изобретению пригодны для лечения 3 2582 1 опухолей как у людей, так и у животных. Примерами опухолей, которые могут быть подвергнуты лечению,являются саркомы, включающие остеогенные саркомы и саркомы мягких тканей, карциномы, например,карцинома молочной железы, карцинома легких, карцинома мочевого пузыря, карцинома щитовидной железы, карцинома простаты и карцинома яичников, лимфомы, включая годкинсовскую и негодкинсовскую лимфомы, нейробластомы, меланомы, миеломы, опухоль Вилмса и лейкемии, включая лимфобластическую острую лейкемию и острую миелобластическую лейкемию. Примерами конкретных опухолей, которые могут быть подвергнуты обработке, являются вирус саркомы Молони, асциты саркомы 180, твердая саркома 180, большая трансплантируемая лейкемия, лейкемия 1210 и лимфоцитарная лейкемия Р 388. Таким образом, рост опухоли, в частности, одной из перечисленных выше опухолей, может быть ингибирован путем введения пациенту, страдающему указанным опухолевым заболеванием, инъекционного раствора по данному изобретению, содержащего активное лекарственное соединение в количестве, достаточном для ингибирования роста указанной опухоли. Инъекционные растворы по данному изобретению вводятся быстро внутривенной инъекцией или инфузией в соответствии с различными возможными схемами ввода доз. Подходящей схемой дозирования для доксорубицина может быть, например, введение 60-75 мг активного лекарственного соединения на м 2 поверхности тела, одной быстрой инфузией, повторяемой через 21 день, по другой схеме каждые 28 дней в течение 3 дней внутривенно вводится доза 30 мг/м 2 в день. Подходящей схемой дозирования для 4-эпи-доксорубицина может являться, например, введение 75-90 мг/ м 2 в виде разовой инфузии, повторяемой через 21 день и аналогичное дозирование может применяться для 4-дезокси-4-иодо-доксорубицина. Идарубицин, т.е. диметоксидаунорубицин может вводиться, например, внутривенно при разовой дозе 1315 мг/м 2 каждый 21 день при лечении твердых опухолей, а при лечении лейкемией предпочтительное дозирование включает в себя, например, введение через каждые 15-21 день внутривенно в течение 3 дней 10-12 мг/м 2 в день, аналогичное дозирование может быть использовано, например, для даунорубицина. Представленные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают данное изобретение. В примерах контроль стабильности готовых к употреблению растворов проводят с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) при следующих экспериментальных условиях. Жидкостной хроматограф, модель 7125, снабженный петлей для ввода образца объемом 10 мкл Хроматографическая колонка- 18 (длина 300 мм, внутренний диаметр 3,9 мм, средний размер частиц 10 мкм Температура колонки комнатная (около 222 С) Подвижная фаза вода ацетонитрил (6931 по объему), доведена до 2 фосфорной кислотой, отфильтрована (стеклянный фильтр, пористость 1 мкм и меньше) и деаэрирована Скорость потока подвижной фазы 1,5 мл/мин Аналитическая длина волны 2541 нм Чувствительность интегрирующего самописца 512 Скорость диаграммной бумаги 1 см/мин При этих условиях пик антрациклинового гликозида наблюдается при времени удерживания около 6 мин. Полученные результаты представлены в примерах в виде таблиц. Экстраполяцию аналитических данных для определения времени, при котором можно ожидать 90 первоначального определения (значение 90) проводят по зависимости Аррениуса. Эта методика обработки аналитических данных хорошо известна и широко применяется и описана в литературе, см., например,,.,.,, .,, 1979. Термин тефлон означаетТМ. Пример 1. Состав На 80 пузырьков(10 мг) Доксорубицин Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды, нужное для доведения до 04 л(5 мл) Доксорубицин (0,8 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, деаэрированной барботированием азота.раствора доводят до 3, по каплям прибавляя хлористоводородную кислоту. Затем добавля 4 2582 1 ют добавочное количество деаэрированной воды для инъекций и доводят раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл переносят в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35 С(4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 1. Таблица 1 Первоначальные значения концентрация 1,992 мг/мл содержание, отн.100,0,3,0 Температура Время 1 100,2 98,0 2 94,8 3 94,2 4 1,979 99,4 90,8 12 1,972 99,0 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 3970 дней 90 при 8 С 2000 дней Схожие данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо хлористоводородные соли 4-эпи-доксорубицина, 4-дезоксидоксорубицина, 4-дезокси-4-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-деметоксидаунорубицина в концентрации 2 мг/мл и 5 мг/мл. Пример 2. Состав На 80 пузырьков(100 мг) Доксорубицин Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,4 л(5 мл) Доксорубицин (8,0 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха барботированием азота. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной от воздуха воды для инъекций и доводят раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл переносят в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35 С(4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности представлены в таблице 2. 2582 1 Таблица 2 Первоначальные значения концентрация 20,06 мг/мл содержание, отн.100,0,2,95 Температура Время 1 100,0 97,5 88,9 61,4 2 94,1 77,8 35,3 3 90,0 66,8 15,6 4 19,91 99,2 87,3 55,2 8 12 19,80 98,7 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 3700 дней 90 при 8 С 1780 дней Схожие данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих хлористоводородную соль 4-эпи-доксорубицина или 4-дезоксидоксорубицина в той же концентрации 20 мг/мл. Пример 3. Состав На 80 пузырьков(0,15 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения объема до 0,400 л(5,00 мл) Доксорубицин С (0,800 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют затем 11,11-диметилацетамид,пропиленгликоль и этанол. После этого по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций и доводят раствор до его конечного объема (0,400 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор распределяют объемами по 5 мл в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкость 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми пробками из хлорбутил-тефлона тефлоном к пузырьку и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35 С(экспресс-контроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 ) 4 недель (45 и 35 ) и 8 недель (4 ). Данные по стабильности, полученные для определения эффективности с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД) представлены ниже в таблице 3. Таблица 3 Первоначальные значения концентрация 2,00 мг/мл содержание, отн.100,03,03 Температура Время 4 С 35 С 45 С 55 С(недели) конц. конц. конц. конц. отн.отн.отн.отн.мг/мл мг/мл мг/мл мг/мл 1 1,892 94,6 1,735 86,7 1,495 74,7 2 1,393 99,7 1,927 96,4 1,624 81,2 1,212 60,6 3 1,908 95,4 1,432 71,6 1,032 51,6 4 2,00 100,0 1,863 93,2 1,266 63,3 8 1,960 98,0 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 4360 дней 90 при 8 С 2200 дней Такие же данные по стабильности могут быть получены также для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлориды 4-эпи-доксорубицина, 46 2582 1 дезоксидоксорубицина, 4-дезокси-4-иододоксорубицина даунорубицина или 4-деметоксидаунорубицина при концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 4. Состав На 80 пузырьков(250,0 мг) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения объема до 0,4 л(5,0 мл) Доксорубицин (0,8 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют и растворяют поливинилпирролидон. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема(0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми крышками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35 С(экспресс-контроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 ), 4 недель (45 С и 35 С) и 8 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 4. Таблица 4 Первоначальные значения концентрация 1,973 мг/мл содержание, отн.100,02,71 Температура Время 1 102,8 98,5 90,8 74,9 2 95,5 80,2 49,3 3 93,2 71,0 32,0 4 1,913 97,0 93,9 64,5 8 1,972 99,9 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 5560 дней 90 при 8 С 2670 дней Такие же данные по стабильности могут быть получены для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлориды 4-эпи-доксорубицина, 4 дезоксидоксорубицина, 4-дезокси-4-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-деметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 5. Состав На 80 пузырьков(1,5 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, необходимое для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, необходимое для доведения до 0,40 л(5,0 мл) Доксорубицин (8,00 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют , -диметилацетамид. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. Прибавляют дополнительное количество дегазированной воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22-мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми пробками из хлорбутил-тефлона, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. 2582 1 Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35 С (экспрессконтроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 ), 4 недель (45 С и 35 С) и 8 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 5. Таблица 5 Первоначальные значения концентрация 19,32 мг/мл содержание, отн.100,02,96 Температура Время 1 103,5 99,1 89,8 80,6 2 99,4 81,6 67,0 3 93,5 76,9 60,1 4 20,03 103,7 92,2 71,3 8 19,99 103,5 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 1310 дней 90 при 8 С 770 дней Аналогичные результаты по стабильности могут быть получены для аналогичных растворов, содержащих хлористоводородную соль 4-эпи-доксорубицина или 4-дезоксидоксорубицина в такой же концентрации,равной 2 мг/мл. Пример 6. Состав На 80 пузырьков(1,5 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,40 л(5,0 мл) Доксорубицин (0,80 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют этанол. Затем по каплям прибавляют 0,1 хлористоводородную кислоту и доводятраствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Испытывают растворы в пузырьках на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35 С(экспресс-контроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 ), 4 недель (45 С и 35 С) и 12 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены в таблице 6 ниже. Таблица 6 Первоначальные значения концентрация 1,979 мг/мл содержание, отн.100,03,11 Температура Время 1 101,6 99,3 2 98,9 3 95,8 4 1,927 97,3 91,9 12 1,939 97,9 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 1270 дней 90 при 8 С 780 дней 8 2582 1 Схожие данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4-эпи-доксорубицина, 4 дезоксидоксорубицина, 4-дезокси-4-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-деметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 7. Состав На 80 пузырьков(0,15 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведениядо 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,400 л(5,00 мл) Доксорубицин (8,000 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. Затем при перемешивании и пропускании азота прибавляют , -диметилацетамид,пропиленгликоль и этанол. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. После этого прибавляют дополнительное количество дегазированной от воздуха воды для инъекций,доводя раствор до конечного объема (0,400 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при температурах 55, 45 и 35 С(экспресс-контроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 С), 4 недель (45 С и 35 С) и 8 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 7. Таблица 7 Первоначальные значения концентрация 20,07 мг/мл содержание, отн.100,02,99 Температура Время 1 95,4 88,7 73,9 2 19,97 99,5 95,0 81,1 61,6 3 90,1 72,9 50,0 4 20,06 99,9 89,8 65,8 8 19,69 98,1 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 846 дней 90 при 8 С 505 дней Сходные данные по стабильности могут быть получены для аналогичных растворов гидрохлорида 4-эпидоксорубицина или 4-дезоксидоксорубицина при той же концентрации 20 мг/мл. Пример 8. Состав На 80 пузырьков(250,0 мг) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,4 л(5,0 мл) Доксорубицин (0,8 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют и растворяют поливинилпирролидон. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту и доводятраствора до 3. Затем прибавляют дополнительное количество дегазированной от воздуха воды для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют по бесцветным стеклянным пузырькам типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают 2582 1 резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35 С (экспрессконтроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 ), 4 недель (45 С и 35 С) и 8 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 8. Таблица 8 Первоначальные значения концентрация 19,57 мг/мл содержание, отн.100,02,62 Температура Время 1 99,9 97,6 86,2 63,8 2 94,2 72,2 30,7 3 92,1 59,1 13,3 4 19,58 100,1 88,7 47,2 8 19,34 98,8 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 2540 дней 90 при 8 С 1290 дней Сходные данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих гидрохлорид 4-эпидоксорубицин или 4-дезоксидоксорубицина при той же концентрации 20 мг/мл. Пример 9. Состав На 80 пузырьков(1,5 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,40 л(5,0 мл) Доксорубицин (0,80 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют , -диметилацетамид. Затем по каплям прибавляют 0,1 хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую мембрану с порами 0,22 мкм под давлением азота. Раствор объемами по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают хлорбутил-тефлоновыми резиновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35 С (экспрессконтроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 С), 4 недель (45 С и 35 С) и 8 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности, представлены ниже в таблице 9. Таблица 9 Первоначальные значения концентрация 1,826 мг/мл содержание, отн.100,03,14 Температура Время 4 С 35 С 45 С 55 С(недели) конц. конц. конц. конц. отн.отн.отн.отн.мг/мл мг/мл мг/мл мг/мл 1 1,830 100,2 1,812 99,2 1,784 97,7 1,605 87,9 2 1,818 99,6 1,781 97,5 1,554 85,1 1,292 70,8 3 1,743 95,4 1,409 77,2 1,018 55,7 4 1,823 99,8 1,734 95,0 1,369 75,0 8 1,792 98,2 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 5815 дней 90 при 8 С 2920 дней 10 2582 1 Сходные данные по стабильности могут быть получены для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4-эпи-доксорубицина, 4 дезоксидоксорубицина,4-эпи-дезокси-4-иододоксорубицина,даунорубицина или 4 деметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 10. Состав На 80 пузырьков(1,5 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,40 л(5,0 мл) Доксорубицин (0,80 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. При перемешивании и пропускании азота прибавляют пропиленгликоль. Затем по каплям прибавляют 0,1 хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35 С (экспрессконтроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 С), 4 недель (45 С и 35 С) и 4 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью хроматографии высокого давления для определения эффективности, представлены ниже в таблице 10. Таблица 10 Первоначальные значения концентрация 1,982 мг/мл содержание, отн.100,03,11 Температура 45 С 55 С конц. конц. конц. отн.отн.отн.отн.мг/мл мг/мл мг/мл 1 99,5 1,934 97,6 1,889 95,3 1,705 86,0 2 1,952 98,5 1,795 90,6 1,483 74,8 3 1,935 97,6 1,699 85,7 1,153 58,2 4 2,056 103,7 1,788 90,2 1,460 73,7 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 1794 дней 90 при 8 С 1025 дней Сходные данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4-эпи-доксорубицина, 4 дезоксидоксорубицина 4-дезокси-4-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-деметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 11. Состав На 80 пузырьков(1,5 мл) Количество 0,1 хлористоводородной кислоты, нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,40 л(5,0 мл) Доксорубицин (0,80 г) растворяют в 90 количества дегазированной от воздуха пропусканием азота воды для инъекций. При перемешивании и пропускании азота прибавляют полиэтиленгликоль 400. Затем по каплям прибавляют 0,1 хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. В конце прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,40 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками, тефлоном к пузырьку, и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 55, 45 и 35 С (экспрессконтроль стабильности) и при 4 С до 3 недель (55 С), 4 недель (45 С и 35 С) и 4 недель (4 С). Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления 2582 1 Таблица 11 Первоначальные значения концентрация 1,907 мг/мл содержание, отн.100,03,07 Температура 4 С конц. отн.отн.мг/мл 1 98,1 1,797 94,2 2 1,710 80,7 1,739 91,2 4 1,873 98,2 1,693 88,8 90 (дней) экстраполяция по уравнению Аррениуса 90 при 4 С 1130 дней 90 при 8 С 680 дней конц. мг/мл 1,871 Сходные данные по стабильности можно получить для аналогичных растворов, содержащих либо гидрохлорид доксорубицина в концентрации 5 мг/мл, либо гидрохлорид 4-эпи-доксорубицина, 4 дезоксидоксорубицина 4-дезокси-4-иододоксорубицина, даунорубицина или 4-деметоксидаунорубицина в концентрации как 2 мг/мл, так и 5 мг/мл. Пример 12. Состав На 80 пузырьков(10 мг) Доксорубицин Количество хлористоводородной кислоты (0,1), нужное для доведения до 3(3) Количество воды для инъекций, нужное для доведения до 0,4 л(5 мл) Доксорубицин (0,8 г) растворяют в 90 количества воды для инъекций, дегазированной от воздуха пропусканием азота. Затем по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту, доводяраствора до 3. Затем прибавляют дегазированную от воздуха воду для инъекций, доводя раствор до конечного объема (0,4 л). Раствор фильтруют через микропористую 0,22 мкм-мембрану под давлением азота. Раствор по 5 мл распределяют в бесцветные стеклянные пузырьки типа 1 емкостью 5-7 мл. Затем пузырьки закрывают резиновыми хлорбутил-тефлоновыми пробками тефлоном к пузырьку и уплотняют алюминиевыми колпачками. Растворы в пузырьках испытывают на стабильность. Пузырьки хранят при 4 и 8 С до 6 месяцев. Данные по стабильности, полученные с помощью жидкостной хроматографии высокого давления(ЖХВД) для определения эффективности представлены ниже в Таблице 12. Таблица 12 Первоначальные значения концентрация 2,039 мг/мл содержание, отн.100,03,06 Время В тех же условиях сходные данные по стабильности могут быть получены для других растворов, указанных в предыдущих примерах. Пример 13. Ускоренное испытание на стабильность проводили при 35 С с целью сравнения стабильности растворов, которых регулировали с помощью различных кислот. Гидрохлорид доксорубицина растворяли в воде для инъекции при концентрации 2 мг/мл.аликвотных проб раствора регулировали до 2,5, 3,0 3,5, 4,0, 4,5, 5,0 с использованием хлористоводородной, серной, фосфорной, метансульфоновой и винной кислот. Растворы под давлением азота фильтровали через микропористую мембрану с размером пор 0,22 мкм. 5 мл-порции растворов затем вводили в стеклянные пузырьки из стекла типа 1 (максимальная емкость пузырьков - 8 мл). Пузырьки закрывали пробкой из хлорбутилового каучука с тефлоновым покрытием и алюминиевой герметизирующей крышкой. Герметичные пузырьки хранили при 35 С. 12 2582 1 Пробы растворов брали из сосудов во время 0 и затем ежедневно. Проводили испытание на стабильность доксорубицина в растворе. Первоначальная стабильность во время 0 принималась равной 100. Результаты представлены ниже в таблице 13. Они показывают очень сходную стабильность растворов. Таблица 13 Данные по стабильности при 35 С Значения стабильностиСерная киФосфорная Метансульфокисслота кислота лота 100.0 100.0 100.0 98.6 100.4 94.7 94.0 94.9 88.6 86.6 86.7 85.1 100.0 100.0 100.0 97.2 97.7 99.2 95.9 96.6 95.3 93.0 87.1 90.8 89.9 86.7 100.0 100.0 100.0 97.0 97.4 98.4 96.3 93.3 92.1 90.3 88.9 84.3 82.8 100.0 100.0 100.0 93.6 93.1 95.4 90.4 88.5 85.2 84.5 83.8 77.6 75.0 100.0 100.0 100.0 94.1 88.6 94.5 85.4 85.5 85.3 80.5 80.6 75.8 77.8 79.6 100.0 100.0 100.0 88.4 91.2 95.4 87.5 86.7 87.2 81.8 81.5 77.1 78.7 78.3 Государственный патентный комитет Республики Беларусь. 220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66. 13