Метиловый эфир 7-аза-9-окса-10-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты, обладающий иммуностимулирующей активностью, и способ его получения

Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

проводят региоселективнь 1 й гидрогенолиз карбонильной группы ацильной цепи цианоборогидридом натрия в системе теграгидрофуран - 2 н соляная кислота с получением соеди нения формулы о ндс окоторое подвергают алкилированию по лактонной карбонильной группе тетрафторборатом триэтилоксония в хлористом метилене с получением енольного эфира формулыКОТОРЫЙ ПОДВРГЗЮТ ВЗЗИМОДВЙСТВИЮ В МСТЗНОЛВ С МВТИЛОВЫМ ЭфИрОМ Е-ЗМИНОкапроновой КИСЛОТЫ, ПОЛУЧСННЫМ ИЗ СГО гидрохлорида ПУТМ обработки МСТЗНОЛЬНЫМ раствором метилата натрия.Изобретение относится К области биоорганической химии, в частности, К новому веЩеству - синтетическому аналогу простагландина В 1 со структурной формулой (1), которое может быть использовано в качестве иммуностимулятора в фармации и медицине, а также к способу его получения.Химическое наименование заявляемого соединения метиловый эфир 7-аза-9-окса-1 Ометил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты.Задача изобретения - новый синтетический аналог простагландина В 1,обладаюЩий фармакологически реальной иммуностимулируюЩей активностью.Поставленная задача решается заявляемым соединением - метиловым эфиром 7-аза-9 окса-10-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты (1), который характеризуется наличием ЫН-группы в положении 7, атома кислорода в положении 9, метильной группы в положении 10 и кетогруппы в положении 11 простанового скелета, а также отсутствием транс 13(14)-двойной связи и 15-гидроксигруппы в ш-цепи.Заявляемое соединение, в отличие от природных простагландинов и родственных эйкозаноидов 1, 2, проявляет иммуностимулируюЩую активность, повышая специфический иммунитет, выделение регуляторных и провоспалительных цитокинов,регулирующих все звенья и механизмы развития иммунитета. В условиях эксперимента на модели иммунодефицита в диапазоне доз 2,5-5,0 мкг/кг проявляет фармакотерапевтическую эффективность. Вещество характеризуется низкой токсичностью и полной безопасностью для организма. Его ВЬ 5 о составляет 880,0 1 85,3 мг/кг внутрибрюшинно,2 О 7 О,О 1 176,5 мг/кг в желудок, индекс Широты фармакологического действия - 828000.Иммунофармакологическая активность И безопасность заявляемого материала испь 1 тана экспериментально на линейных и аутбреднь 1 х мышах по стандартным методическим приемам и рекомендациям 3, соответствующим правилам надлежащей лабораторной практики (СЬР). Результаты экспериментов обработаны статистически, оценены параметрическим методом по критерию г Стьюдента 4 и Представлены в табл. 1-4.В табл. 1 представлены данные, свидетельствующие о дозозависимом (2,5-5,0 мкг/кг) влиянии заявляемого вещества на В-клеточный (гуморальный) иммунитет у высокореагирующих на антигены эритроцитов барана мышей линии СВА, следствием чего является 1,5-2-кратное увеличение числа антителопродуцентов (АОК) на 106 спленоцитов, параллельное увеличение общего количества АОК в селезенке и уровня циркулирующих в периферической крови антител.В табл. 2 представлены данные, показывающие, что заявляемое вещество в дозах 2,55,0 мкг/кг орально стимулирует В-клеточный гуморальный иммунитет у мышей линии С 57 В 1/6, отличающихся низкой иммунореактивностью к эритроцитам барана. Следовательно, это вещество способно преодолевать генетически обусловленную низкую иммунореактивность, присущую мышам данной линии, что дает основание отнести заявляемое соединение к сильнодействующему иммуностимулирующему агенту.В табл. 3 представлены данные, показывающие, что заявляемое соединение в дозах 2,5 и 5,0 мкг/кг при введении в желудок одновременно с сенсибилизацией животных стимулирует Т-клеточный иммунный ответ, увеличивая индекс реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) у мышей-гибридов на 45 и 69 соответственно. При условии введения этого соединения в тех же дозах, но одновременно с разрешающей дозой антигена возрастание индекса реакции ГЗТ наблюдается в диапазоне доз 5-10 мкг/кг и достигает 30-35 . Результаты тестирования свидетельствуют о том, что заявляемое соединение стимулирует Т-клеточный иммунный ответ, влияя преимущественно на процесс образования клеток антигенспецифических Т-лимфоцитов. Вместе с тем тестируемое соединение сохраняет способность повышать выработку цитокинов этими Т-лимфоцитами в случае введения его одновременно с разрешающей дозой антигена. Результаты тестирования заявляемого соединения свидетельствуют о том, что новый химико-фармацевтический материал является более перспективным потенциальным иммуномодулятором, усиливающим выработку эндогенных цитокинов, по сравнению с разрабатываемыми в настоящее время рекомбинантными препаратами цитокинов.В табл. 4 представлены результаты, свидетельствующие о том, что заявляемое соединение при использовании в эксперименте в качестве иммуностимулятора проявляет иммунотерапевтическую эффективность, нормализуя иммуносупрессию, индуцированную однократным острым у-облучением (2 Гр) мышей-самок линии СВА. Максимальный иммунокорригирующий эффект соединения на модели постлучевого иммунодефицита отмечается в дозе 2,5 мкг/кг, когда показатели В-клеточного (гуморального) иммунитета восстанавливаются на 90 по сравнению с облученными, но нелеченными животными.Заявляемое соединение малотоксично при введении однократно внутрибрюшинно и внутрь (интрагастрально) аутбредным мышам 1 СК обоего пола. Максимально переносимая доза соединения, не вызывающая гибели мышей, составляет 600 мг/кг, тогда как после введения вещества в дозе 900 мг/кг наступает быстрая гибель всех животных в группе. 131350 составляет 880,0 1 85,5 мг/кг внутрибрюшинно. При введении соединения в желудок(интрагастрально) гибель мышей наступает при дозах 2100-3500 мг/кг. 131350 интрагастрально составляет 2070,0 1 176,5 мг/кг. Оптимальный фармакотерапевтический эффект в эксперименте отмечается при дозе 2,5 мкг/кг соединения (эффективная доза ЕВ). Следовательно, терапевтический индекс (ТИ) заявляемого соединения составляетС практической точки зрения это означает, что безопасность фармацевтического материала фактически абсолютная.Другая задача изобретения - способ получения метилового эфира 7-аза-9-окса-1 Ометил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты (1). Аналоги заявляемого способа отсутствуют. Заявляемый способ получения соединения (1) представлен на схеме и включает четыре стадииПервая стадия представляет собой 3(С)-ацилирование 5-метилтетроновой кислоты (П) каприловой кислотой под действием эквимолярных количеств триэтиламина и дициклогексилкарбодиимида (ДЦГК) и каталитических количеств 4-(диметиламино)пиридина(ДМАП) в хлористом метилене с получением Б-трикарбонильного соединения (1 П). Вторая стадия включает региоселективный гидрогенолиз карбонильной группы ацильной Цепи Б-трикарбонильного соединения (П 1) Цианоборогидридом натрия в системе тетрагидрофуран (ТГФ) - 2 н соляная кислота с получением В-дикарбонильного соединения (1/). Третья стадия заключается в алкилировании соединения (1/) по лактонной карбонильной группе тетрафторборатом триэтилоксония в хлористом метилене с получением енольного эфира (У). На четвертой стадии енольный эфир (У) подвергают взаимодействию в метаноле с метиловым эфиром е-аминокапроновой кислоты, полученным из его гидрохлорида путем обработки метанольным раствором метилата натрия с образованием Целевого метилового эфира 7-аза-9-окса-1 О-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты (1).Заявляемый способ прост в исполнении, технологичен, не требует применения вь 1 соких или низких температур, редких и труднодоступных реагентов.Для лучшего понимания сущности заявляемого способа получения метилового эфира 7-аза-9-окса-1 О-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты (1) приводится пример, однако возможности применения способа этим примером не ограничиваются.Стадия 1. Получение 3-каприлоил-5-метилтетроновой кислоты (П 1). К перемешиваемой суспензии тетроновой кислоты (П) (9 ммоль) в безводном хлористом метилене при охлаждении (О С) приливают 1,38 мл (9,9 ммоль) триэтиламина. К образовавшемуся го 4могенному раствору триэтиламмонийной соли последовательно добавляют 4-(диметиламино)пиридин (0,36 г, 2,97 ммоль), 1,56 мл (9,9 ммоль) каприловой КИСЛОТЫ и, наконец,по порциям дициклогексилкарбодиимид (2,22 г, 10,8 ммоль). Охлаждение убирают и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 15 ч. Выпавшую дициклогексилмочевину отфильтровь 1 вают и промывают этилацетатом. Объединенные фильтрать 1 упаривают. К остатку добавляют 80 мл диэтилового эфира, 25 мл 1,5 н. НС 1 и полученную смесь встряхивают в делительной воронке. После отделения водного слоя органическую фазу промывают 1,5 н. НС 1 (20 мл) и водой (20 мл), сушат М 35 О 4. После выпаривания растворителя продукт реакции очиЩают на колонке с силикагелем (гексан - эфир, градиентное элюирование) и перекристаллизовь 1 вают. Выход 81 . Т.пл. 39-41 С (эфир).Стадия 2. Получение 5-метил-3-октилтетроновой кислоты (1/). К раствору 1 ммоль Б-трикарбонильного соединения (111) в 6 мл тетрагидрофурана при перемешивании добавляют 5 мл 2 н водного раствора НС 1, а затем порциями прибавляют 0,16 г (2,5 ммоль) ЫаВН 3 СЫ. Реакционную смесь перемешивают до окончания реакции (контроль методом тонкослойной хроматографии (ТСХ. Тетрагидрофуран упаривают в вакууме, водную фазу обрабатывают эфиром, вытяжки сушат Ыа 25 О 4. Эфир отгоняют в вакууме, остаток пропускают через колонку с силикагелем, продукт окончательно очищают перекристаллизацией. Выход 94 . Т.пл. 63,5-65 С (гексан).Стадия 3. О-Алкилирование 3-алкилтетроновой кислоты (1/) тетрафторборатом триэтилоксония. К раствору 2,5 ммоль 3-алкилтетроновой кислоты (1/) в 30 мл хлористого метилена при перемешивании добавляют 1,42 г (7,5 ммоль) тетрафторбората триэтилоксония. По окончании реакции (контроль методом ТСХ) реакционную смесь пропускают через слой силикагеля (элюент-хлороформ). Элюат упаривают в вакууме. После хроматографирования остатка на короткой колонке с окисью алюминия (элюент- эфир и гексан) соответствующий енольный эфир получают с выходом 98 в виде подвижного маслообразного веЩества.Стадия 4. Синтез метилового эфира 7-аза-9-окса-10-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты (1). К 1,18 г (0,0065 моль) гидрохлорида метилового эфира е-аминокапроновой кислоты при перемешивании и охлаждении (0 С) добавляют свежеприготовленный раствор метилата натрия, полученный растворением 0,15 г (0,0065 моль) металлического натрия в 8 мл метанола. Смесь перемешивают 5-10 мин при комнатной температуре, а затем добавляют к 0,001 моль этоксиенольного эфира (У). Реакционную смесь перемешивают при 35-40 С до исчезновения исходного эфира (контроль методом ТСХ). Метанол отгоняют в вакууме. Охлажденный остаток обрабатывают 2 н. НС 1 до рН 2 (по индикаторной

МПК / Метки

МПК: C07D 307/00, A61P 37/00

Метки: активностью, способ, 7-аза-9-окса-10-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой, обладающий, иммуностимулирующей, метиловый, получения, кислоты, эфир

Код ссылки

<a href="http://bypatents.com/8-10155-metilovyjj-efir-7-aza-9-oksa-10-metil-11-oksoprost-812-enovojj-kisloty-obladayushhijj-immunostimuliruyushhejj-aktivnostyu-i-sposob-ego-polucheniya.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Метиловый эфир 7-аза-9-окса-10-метил-11-оксопрост-8(12)-еновой кислоты, обладающий иммуностимулирующей активностью, и способ его получения</a>

Похожие патенты