Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

СПОСОБ ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУР К ПОВЫШЕННОМУ СОДЕРЖАНИЮ ИОНОВ АЛЮМИНИЯ В ПОЧВЕ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ботаники имени В.Ф. Купревича Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Домаш Валентина Иосифовна Пелагейчик Тамара Яковлевна Ермолицкая Людмила Васильевна Ходорцова Лилия Федоровна Янчевская Тамара Георгиевна Вербицкая Надежда Александровна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ботаники имени В. Ф. Купревича Национальной академии наук Беларуси(57) Способ оценки устойчивости зерновых культур к повышенному содержанию ионов алюминия в почве, отличающийся тем, что в качестве показателя используют активность протеолитического фермента -бензоиларгинин-п-нитроанилидазы, которую определяют в надосадочной жидкости, полученной центрифугированием экстракта размолотого зерна зрелых культур 1/15 М фосфатным буфером при рН 8,5, и рассчитывают по формуле Д 1000 ЕА,0,5 н где ЕА - активность фермента Д - разность экстинкций опытной и контрольной пробы- объем пробы н - навеска размолотого зерна, г абсолютно сухой массы,при этом если активность протеолитического фермента в зрелом зерне составляет 50 и более единиц, то зерновую культуру относят к устойчивым к повышенному содержанию ионов алюминия в почве. Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции зерновых культур и может быть использовано для отбора устойчивых к действию алюминия образцов ячменя и озимого тритикале. Известен способ определения устойчивости зерновых культур к повышенному содержанию ионов алюминия, включающий вычисление коэффициента редукции поглотительной функции корневой системы растений. Оценивают устойчивость ячменя к 8112 1 2006.06.30 повышенному содержанию ионов алюминия с учетом полученного коэффициента. Известный способ осуществляется путем проращивания семян и помещения их в водный питательный раствор, содержащий ионы алюминия в качестве абиотического фактора, и в процессе выращивания определяют изменение водопоглощающей активности корневой системы путем ежедневного взвешивания сосудов с растениями в питательном растворе 1. Недостатком способа является его длительность и трудоемкость, которые имеют место при физиологических методах исследований. Задачей настоящего изобретения является разработка способа, снижающего трудоемкость и длительность оценки устойчивости зерновых культур к повышенному содержанию ионов алюминия в почве. Поставленная задача достигается тем, что в способе оценки устойчивости зерновых культур к повышенному содержанию ионов алюминия в почве в качестве показателя используют активность протеолитического фермента -бензоиларгинин-пнитроанилидазы, которую определяют в надосадочной жидкости, полученной центрифугированием экстракта размолотого зерна зрелых культур 1/15 М фосфатным буфером при рН 8,5, и рассчитывают по формуле Д 1000,0,5 н где ЕА - единица активности Д - разность экстинкций опытной и контрольной пробы- объем пробы н - навеска размолотого зерна, г абсолютно сухой массы,при этом если активность протеолитического фермента в зрелом зерне составляет 50 и более единиц, то зерновую культуру относят к устойчивым к повышенному содержанию ионов алюминия в почве. Способ осуществляется следующим образом. Зерно исследуемых культур измельчают, отвешивают определенную навеску, экстрагируют ее 1/15 М фосфатным буфером, рН 8,5. Смесь встряхивают в течение часа, центрифугируют и получают надосадочную жидкость, в которой определяют активность фермента -бензоиларгинин-п-нитроанилидазы следующим образом. В три пробирки (трехкратная повторность) вносят по 1 мл фосфатного буфера 1/15 М, рН 8,5, 0,5 мл надосадочной жидкости 1 мл 2,3 мМ раствора -бензоиларгинин-п-нитроанилида. Затем проводят инкубирование смеси при 37 С в течение 30 мин. Реакцию останавливают 0,5 мл 30 -ной уксусной кислоты. В контрольные пробирки после добавления надосадочной жидкости вносят 0,5 мл уксусной кислоты, затем добавляют 1 мл фосфатного буфера и 1 мл -бензоиларгинин-п-нитроанилида. После этого измеряют поглощение при 405 нм опытных пробирок против контрольных. Активность фермента (в единицах активности, ЕА) вычисляют по формуле Д 1000,0,5 н где ЕА - единица активности фермента,Д - разность экстинкций опытной и контрольной пробы- объем пробы н - навеска размолотого зерна, г абсолютно сухой массы. Исследования проводили с зерном различных сортов ячменя. Пример 1. Зерно ячменя измельчают и берут навеску 200 мг, на холоду извлекают фермент 1/15 М фосфатным буфером, рН,85, центрифугируют и получают надосадочную жидкость, в которой определяют активность фермента вышеописанным способом. 2 8112 1 2006.06.30 В табл. 1 и 2 приведены сравнительные данные с прототипом, где индекс устойчивости определяли по известному способу - путем выращивания растений на фильтровальной бумаге. Получают следующие данные. Таблица 1 Индекспп. Сорта ячменя ЕА/г абс.сух.массы устойчивости (К) 1 Карина 43,570,25 0,40 2 Эльгина 45,620,12 0,42 3 Зазерский 44,500,38 0,47 4 Надя 50,800,76 0,51 Неустойчивые ср. 46,120,38 ср. 0,45 5 Московский 82,000,43 0,76 6 Джюгай 76,700,96 0,69 7 Рамона 77,741,20 0,75 8 Эффенди 78,560,97 0,80 Устойчивые ср. 78,750,89 ср. 0,75 Если активность протеолитического фермента в зрелом зерне ячменя в составляет 50 и более единиц, то зерновую культуру относят к устойчивым к повышенному содержанию ионов алюминия в почве. Пример 2. Проводят экстракцию и определение активности фермента из зерна озимого тритикале как было указано выше. Получают следующие данные. Таблица 2 пп Сортообразцы тритикале ЕА/г абс.сух.массы Индекс устойчивости 1 Уго х Авродата 27,540,13 0,48 2 Т 441 х Армадилло 24,160,02 0,49 3 Авролата 38,170,89 0,51 4 Уго 25,490,02 0,54 5 Модуль 31,501,26 0,56 6 Альмо 26,520,21 0,60 Неустойчивые ср. 29,300,46 ср. 0,53 7 Альмо х Авролата 51,120,97 0,70 8 Аврозис 53,981,63 0,74 9 Мально 53,690,13 0,78 10 Авродата 60,850,62 0,81 11 Мально х Авролата 63,251,06 0,81 12 Модуль х Аврозис 55,180,84 0,83 Устойчивые ср. 56,350,87 ср. 0,78 Если активность протеолитического фермента в зрелом зерне тритикале составляет 50 и более единиц, то зерновую культуру относят к устойчивым к повышенному содержанию ионов алюминия в почве. Анализируя данные табл. 1 и 2 можно видеть, что активность (ЕА) протеолитического фермента -бензоиларгинин-п-нитроанилидазы в различных по устойчивости сортах ячменя и тритикале тесно коррелирует с индексом устойчивости. Коэффициент корреляцииравен 0,98 и 0,92 соответственно. 3 8112 1 2006.06.30 Таким образом, предлагаемый способ оценки устойчивости зерновых культур к повышенному содержанию ионов алюминия в почве позволяет оценить большое количество образцов за короткий промежуток времени (20 образцов в трехкратной повторности за 8 часовой рабочий день). Для определения требуется незначительное количество материала(200 мг). Способ прост в исполнении, не требует дефицитных, а также вредных для здоровья реактивов. Источники информации 1.2078499 С 1, 1997. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4

МПК / Метки

МПК: A01H 1/04, G01N 33/00

Метки: зерновых, алюминия, культур, способ, устойчивости, содержанию, повышенному, ионов, почве, оценки

Код ссылки

<a href="http://bypatents.com/4-8112-sposob-ocenki-ustojjchivosti-zernovyh-kultur-k-povyshennomu-soderzhaniyu-ionov-alyuminiya-v-pochve.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Способ оценки устойчивости зерновых культур к повышенному содержанию ионов алюминия в почве</a>

Похожие патенты