Способ повышения активности сперматозоидов самца осетровой рыбы

Номер патента: 17418

Опубликовано: 30.08.2013

Авторы: Плавский Виталий Юльянович, Барулин Николай Валерьевич

Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АКТИВНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ САМЦА ОСЕТРОВОЙ РЫБЫ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт физики имени Б.И.Степанова Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Плавский Виталий Юльянович Барулин Николай Валерьевич(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт физики имени Б.И.Степанова Национальной академии наук Беларуси(56)2035858 1, 1995.2399201 1, 2010.1803013 1, 1993.1127554 , 1984. АС 786947, 1980. АС 625704, 1980. СЕМЕНОВА Л.Э. Исследование процесса замораживания спермы рыб осетровых пород и его техническое обеспечение. Автореф. дис. - СанктПетербург, 2002. - С. 7-8, 14.(57) Способ повышения активности сперматозоидов самца осетровой рыбы, при котором стимулируют созревание спермы у самца осетровой рыбы введением нерестина 5-А в количестве 0,1 мл/кг массы самца, отбирают сперму и воздействуют на нее лазерным излучением с длиной волны 67020 нм при плотности мощности излучения 3,020,2 мВт/см 2 в сочетании с магнитным полем с индукцией 505 мТл в течение 20-30 с однократно. Изобретение относится к рыбоводству, а именно к способам воспроизводства осетровых рыб, и может найти широкое применение как в технологии прудового, так и индустриального осетроводства. Известен способ сохранения биологических свойств спермы, включающий ее разбавление, эквилибрацию в постоянном магнитном поле индукцией 40000-400000 Гс и последующее ее замораживание перед хранением 1. Недостатком способа является незначительное повышение активности и оплодотворяющей способности спермы после такого воздействия. Наиболее близким к заявляемому способу является способ обработки спермы рыб для ее стимуляции, основанный на воздействии на сперму перед оплодотворением лазерным излучением красной и/или инфракрасной спектральной области. Время экспозиции выбирают не менее 10 с при энергетической дозе 1 мДж/см 2-2,5 Дж/см 2 2. Как следует из описания, в качестве источника излучения в 2 используется либо гелий-неоновый лазер красной области спектра с длиной волны 632,8 нм, работающий в непрерывном режиме,либо импульсный лазер Узор инфракрасной области спектра с длиной волны 890 нм. 17418 1 2013.08.30 Недостатком известного способа является низкий стимулирующий эффект. Задачей заявленного изобретения является повышение качества спермы за счет увеличения времени подвижности сперматозоидов после активации водой, что приводит к более высокой вероятности успешного оплодотворения икры. Поставленная задача решается следующим образом. В способе повышения активности сперматозоидов самца осетровой рыбы, при котором стимулируют созревание спермы у самца осетровой рыбы введением нерестина 5-А в количестве 0,1 мл/кг массы самца, отбирают сперму и воздействуют на нее лазерным излучением с длиной волны 67020 нм при плотности мощности излучения 3,00,2 мВт/см 2 в сочетании с магнитным полем с индукцией 505 мТл в течение 20-30 с однократно. Сущность предлагаемого способа заключается в том, что сперма осетровых рыб подвергается воздействию лазерного излучения в присутствии постоянного магнитного поля. Воздействие осуществляют поляризованным лазерным излучением красной области спектра 67020 нм, плотностью мощности 3,00,2 мВт/см 2 в сочетании с магнитным полем индукцией 505 мТл. Излучатель аппарата с магнитной насадкой располагают таким образом, чтобы сперма рыб находилась под проекцией магнитной насадки, а размер светового пятна соответствовал размеру слоя облучаемой спермы. При этом излучение лазера проходит через отверстие, расположенное в центре магнитной насадки. Мощность излученияна выходе излучателя контролируют с помощью измерителя средней мощности ИМО-3 С. Плотность мощности (в мВт/см 2) излучения, воздействующего на слой спермы, определяют по формуле/, где- средняя мощность излучения в мВтплощадь светового пятна (в см 2) на уровне слоя спермы. Затем проводят аналогичный эксперимент при выключенном лазерном излучении, когда на сперму воздействует только магнитное поле. Следующую серию экспериментальных исследований проводят для изучения воздействия на сперму лазерного излучения в отсутствии магнитного поля. С этой целью из лазерного излучателя извлекается магнитная насадка и вставляется расфокусирующая насадка, обеспечивающая аналогичную расходимость лазерного излучения, как и в случае использования магнитной насадки. Отбор спермы осуществляют от самцов бестера 1 при помощи катетера и пластикового шприца Жане. Для стимулирования созревания применяют препарат нерестин 5-А в количестве 0,1 мл/кг. Средняя масса самцов составляет - 6,3 кг, средняя длина - 92,7 см. Средний объем эякулянта - 110 см 3. Температура воды в период взятия половых продуктов составляет 14,5 С. Вся отобранная сперма оценивается в 5 баллов по 5 балльной шкале Персова. Для определения оптимального времени воздействия, оказывающего максимальный стимулирующий эффект на подвижность сперматозоидов осетровых рыб, воздействие физических факторов на сперму проводят в течение 10, 20, 30, 40, 50, 60 с. После этого сперма помещается на хранение в прохладное затемненное место. Температура хранения не более 4-5 С. По истечении 24 ч проводится определение времени активности сперматозоидов (время поступательного движения сперматозоидов после активации водой). Для определения активности пробу спермы (10 мкл) наносят на предметное стекло, и при увеличении в 200 раз вначале исследуют без разбавления водой, и определяют отсутствие (присутствие) примеси в пробах (форменные элементы крови, микроорганизмы и пр.). Затем вносят каплю воды на предметное стекло, перемешивают со спермой и на секундомере засекают начало активации сперматозоидов. При прекращении поступательного движения 90 сперматозоидов время останавливают. У каждой пробы время поступательного движения определяется не менее 3-х раз. По результатам полученных данных определяют величину стимулирующего действия физических факторв на время активности сперматозоидов(0/)100 , где 0 - время 2 17418 1 2013.08.30 поступательного движения сперматозоидов после активации водой через 24 ч хранения после воздействия физических факторов (опытная группа),- время поступательного движения сперматозоидов после активации водой через 24 ч хранения без воздействия оптического излучения (контрольная группа). Контрольные образцы икры выдерживают в тех же условиях, что и опытные образцы. Статистическую обработку полученных результатов проводят с помощью статистических приложений 7.5. с использованием / критерия Стьюдента. Установлено, что воздействие на сперму самцов осетровых рыб лазерным излучением красной области спектра в сочетании с магнитным полем приводит к повышению активности сперматозоидов, что выражается в увеличении времени поступательного движения сперматозоидов после активации водой. Вышесказанное подтверждается данными, представленными в таблице. Влияние лазерного излучения красной области спектра 67020 нм,3,00,2 мВт/см 2, влияние постоянного магнитного поля магнитной индукцией 505 мТл, а также совместного действия лазерного излучения А 67020 нм,Р 3,00,2 мВт/см 2 и постоянного магнитного поля магнитной индукцией 505 мТл на время активности сперматозоидов самцов осетровых рыб после активации водой через 24 ч после хранения Величина стимуВремя воз- Время поУровень Группы лирующего дейдействия, с движности, с значимости ствия, у,Контроль 0 120,07,6 100 Магнитное поле 505 мТл 10 124,27,4 103,51,6 20 122,39,5 101,96,7 30 125,35,0 104,41,1 40 123,83,7 103,24,5 50 125,09,0 104,22,3 60 126,88,8 105,74,2 0,05 10 168,27,8 140,23,4 0,05 Лазерное излучение (670 нм,20 183,77,5 153,12,7 0,05 красная область спектра,2 Р 3,00,2 мВт/см ) 30 210,69,1 175,54,2 0,01 40 260,07,6 216,76,4 0,05 50 252,08,9 210,05,6 0,05 60 241,68,6 201,33,2 10 199,69,4 166,35,6 0,05 Лазерное излучение (670 нм,20 294,010,2 245,06,8 0,05 красная область спектра,23,00,2 мВт/см )30 252,511,2 210,45,4 0,05 магнитное поле (505 мТл) 40 226,47,8 188,77,0 0,05 50 204,08,9 170,05,9 60 171,87,6 143,26,9 Из представленных данных следует, что воздействие постоянного магнитного поля 505 мТл на сперму самцов осетровых рыб приводит к повышению качества половых продуктов, что проявляется в увеличении времени активности сперматозоидов после активации водой. Однако стимулирующее действие постоянного магнитного поля является слабовыраженным. Максимальный эффект наблюдается при времени воздействия 60 с и составляет 105,74,2 . В этом случае максимальное время подвижности сперматозоидов составляет 0126,88,8 с, тогда как для контрольных образцов 120,07,6 с. Более выраженное активирующее действие на сперму осетровых рыб оказывает воздействие лазерным излучением красной области спектра 670 нм,3,00,2 мВт/см 2. 3 17418 1 2013.08.30 При оптимальных условиях воздействия лазерным излучением при отсутствии магнитного поля время подвижности сперматозоидов составляет 0260,07,6 с (216,76,4 ) и наблюдается при экспозиции 40 с. Уменьшение или увеличение времени экспозиции приводит к снижению стимулирующего действия. Однако наиболее выраженное активирующее действие на сперму осетровых рыб оказывает совместное действие лазерного излучения 67020 нм,3,00,2 мВт/см 2 и постоянного магнитного поля 505 мТл. При совместном действии указанных физических факторов максимальный эффект стимуляции наблюдается при времени воздействия 20 с и составляет 2456,8(0294,010,2 с). Достаточно выраженным также является воздействие лазерного излучения и постоянного магнитного поля в течение 30 с 2456,8(0210,45,4 с). Заявляемый способ не является простой суммой двух известных способов, основанных на воздействии физических факторов. При воздействии только магнитного поля максимальное стимулирующее действие наблюдается при экспозиции 60 с. При воздействии только лазерным излучением максимальное стимулирующее действие наблюдается при экспозиции 40 с. При одновременном действии двух физических факторов максимальный стимулирующий эффект на сперму осетровых рыб наблюдается при экспозиции 20-30 с. Таким образом, при одновременном действии двух физических факторов оптимальное время воздействия ниже, чем каждого из них в отдельности. Синергизм действия двух физических факторов проявляется в том, что эффект стимуляции при одновременном действии лазерного излучения и магнитного поля 2456,8 в течение 20 с значительно превышает сумму эффектов 101,9153,1155,0 каждого из воздействующих факторов в отдельности 101,96,7(для магнитного поля) и 153,12,7(для лазерного излучения). Все это свидетельствует, что заявляемый способ обработки спермы рыб не является простой суммой двух известных способов. Характерно, что сперма, подвергнутая совместному действию лазерного излучения и магнитного поля, обладает более высокой способностью к оплодотворению икры. Так, если в случае использования интактой (контрольный вариант) спермы процент оплодотворения икры осетровых рыб составляет 75 , то в случае использования спермы,обработанной заявляемым способом, процент оплодотворения икры достигает 87 . Таким образом, заявляемый способ позволяет увеличить время подвижности сперматозоидов после активации водой и повысить вероятность успешного оплодотворения икры. Заявляемый способ может использоваться в практике осетроводства с целью сохранения качества спермы самцов при длительном хранении без консервации в условиях, когда сбор спермы самцов уже осуществлен, а овуляция икры самок растягивается на продолжительное время. Источники информации 1. А.с. СССР 625704, МПК А 617/02. 2. А.с. СССР 1309937, МПК А 01 К 61/00, 1987. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 4

МПК / Метки

МПК: A01K 61/00

Метки: повышения, осетровой, рыбы, активности, сперматозоидов, способ, самца

Код ссылки

<a href="http://bypatents.com/4-17418-sposob-povysheniya-aktivnosti-spermatozoidov-samca-osetrovojj-ryby.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Способ повышения активности сперматозоидов самца осетровой рыбы</a>

Похожие патенты