Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

(51)61 19/00 НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СРЕДА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ СПЕРМЫ К ОСЕМЕНЕНИЮ(71) Заявитель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Голубец Леонид Викторович Шейко Иван Павлович Шпаковская Ольга Анатольевна Симоненко Владимир Павлович(73) Патентообладатель Республиканское унитарное предприятие Институт животноводства Национальной академии наук Беларуси(57) Среда для подготовки спермы к осеменению, содержащая хлорид натрия, гидрокарбонат натрия, фосфат натрия, лактат натрия, пируват натрия, хлорид калия, хлорид магния,хлорид кальция, бычий сывороточный альбумин, гепарин, гентамицин, феноловый красный, буфери деионизированную воду при следующем соотношении компонентов,мас.хлорид натрия 5,800-5,880 гидрокарбонат натрия 2,055-2,150 фосфат натрия 0,034-0,036 лактат натрия 3,935-3,990 пируват натрия 0,105-0,115 хлорид калия 0,220-0,240 хлорид магния 0,395-0,405 хлорид кальция 0,029-0,030 бычий сывороточный альбумин 5,950-6,050 гепарин 0,145-0,155 гентамицин 0,045- 0,055 феноловый красный 0,010-0,012 буфер 0,220-0,240 вода деионизированная остальное. Изобретение относится к животноводству, в частности к средам для использования спермиев быков при получении предымплантационных зародышей крупного рогатого скота из ооцитов вне организма. Известна среда для разбавления спермы животного, предназначенная для повышения выживаемости и оплодотворяющей способности сперматозоидов, включающая следующие компоненты при нижеследующем соотношении компонентов, мас.дисахарид 8414 1 2006.08.30 лактоза 6,10-10,00 трис-аминометан 0,05-0,10 двунатриевая соль уксусной кислоты 0,06-0,12 декстрин 0,30-5,00 желток куриного яйца 13,0-14,0 глицерин 8,0-9,0 и вода дистиллированная остальное 1. Однако данная среда для разбавления спермы и активизации сперматозоидов малоэффективна при подготовке спермиев к осеменению (капацитация) для получения качественных предымплантационных зародышей крупного рогатого скота. Задача изобретения - повышение эффективности активизации спермиев быков при получении предымплантационных зародышей вне организма. Для решения данной задачи предлагается среда для подготовки спермы к осеменению,содержащая хлорид натрия, гидрокарбонат натрия, фосфат натрия, лактат натрия, пируват натрия, хлорид калия, хлорид магния, хлорид кальция, бычий сывороточный альбумин,гепарин, гентамицин, феноловый красный, буфери деионизированную воду при следующем соотношении компонентов, мас.хлорид натрия 5,800-5,880 гидрокарбонат натрия 2,055-2,150 фосфат натрия 0,034-0,036 лактат натрия 3,935-3,990 пируват натрия 0,105-0,115 хлорид калия 0,220-0,240 хлорид магния 0,395-0,405 хлорид кальция 0,029-0,030 бычий сывороточный альбумин 5,950-6,050 гепарин 0,145-0,155 гентамицин 0,045-0,055 феноловый красный 0,010-0,012 буфер 0,220-0,240 вода деионизированная остальное. Эффективность активизирования спермиев проверенного по потомству быка-производителя изучали при осеменении полноценных ооцитов коров вне организма при различном соотношении исходных компонентов в трех составах сред, приведенных в табл. 1. Таблица 1 Состав среды Компоненты 1 2 3 Хлорид натрия 5,800 5,840 5,880 Гидрокарбонат натрия 2,055 2,100 2,150 Фосфат натрия 0,034 0,035 0,036 Хлорид калия 0,220 0,230 0,240 Хлорид магния 0,395 0,400 0,405 Хлорид кальция 0,029 0,0295 0,030 Лактат натрия 3,935 3,960 3,990 Пируват натрия 0,105 0,110 0,115 Бычий сывороточный альбумин 5,950 6,000 6,050 Гепарин 0,145 0,150 0,155 Гентамицин 0,045 0,050 0,055 Феноловый красный 0,010 0,010 0,012 Буфер 0,220 0,230 0,240 Вода деионизированная до 100 до 100 до 100 Кроме того, каждый состав указанных сред был испытан на влияние его на подвижность и выживаемость сперматозоидов при комнатной температуре в течение 6 часов. 2 8414 1 2006.08.30 Лучшие результаты по этим показателям получены при использовании среды второго состава, данные показаны в табл. 2. Таблица 2 Подвижность спермиев,Показатель выживаемости Состав среды(М) Первый 20 4,30,07 21510,8 Второй 20 4,70,06 22410,9 Третий 20 4,50,08 22111,5 Контроль (ТС-199) 20 4,10,09 18011,9 Среду готовят следующим образом. В стерильную чистую химическую колбу вносят точно отмеренные компоненты оптимального (второго) состава сред для подготовки спермы к осеменению ооцитов крупного рогатого скота, доводят до соответствующего объема деионизированной водой комнатной температуры, содержимое тщательно перемешивают. Стерилизацию среды осуществляют путем фильтрации через фильтр с диаметром пор, равным 0,22 мк. Фильтрат хранят в темном месте при температуре 4-9 С. По мере необходимости среду нужного объема переносят в чашки Петри, доводят до температуры 38-39 С, которая соответствует температуре тела крупного рогатого скота,помещают туда специально подготовленные сперматозоиды для доведения их до кондиции активного осеменения ооцитов вне организма (капацитация). Среда представляет собой однородную эмульсию, рН которой равна 7,40,2. Оптимальный состав (второй) среды испытали на эффективность стимулирования сперматозоидов быка-производителя при оплодотворении ооцитов отличного и хорошего качества вне организма. Спермии были подготовлены по известной методике, помещены в питательную среду, куда затем помещали качественные ооциты коров-доноров. Контролем служила отечественная среда ТС-199, используемая для капацитации спермиев в биотехнологии. Результаты исследований - в табл. 3. Таблица 3 Использовано Зародышей на стадии Морул и бластоцистов Среда ооцитов в опыте,дробления шт. Предлагаемая 736 373 50,7 279 37,9 ТС-199 380 98 26,0 Таким образом, использование среды предложенного состава для подготовки спермы быков-производителей к осеменению ооцитов коров-доноров вне организма (капацитация) позволяет значительно активизировать сперматозоиды, повысить их жизнеспособность, что сказывается на эффективности оплодотворения ооцитов животных в предымплантационный период коровам-реципиентам. Источники информации 1. А.с. СССР 1197660, МПК А 61 7/02 // Бюл.46. - 1985. Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3

МПК / Метки

МПК: A61D 19/00

Метки: среда, подготовки, осеменению, спермы

Код ссылки

<a href="http://bypatents.com/3-8414-sreda-dlya-podgotovki-spermy-k-osemeneniyu.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Среда для подготовки спермы к осеменению</a>

Похожие патенты