Способ определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу

Скачать PDF файл.

Текст

Смотреть все

(51) МПК НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ЛЮПИНА УЗКОЛИСТНОГО К АНТРАКНОЗУ(71) Заявитель Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ботаники имени В.Ф.Купревича Национальной академии наук Беларуси(72) Авторы Мунтян Мария Сергеевна Домаш Валентина Иосифовна Купцов Николай Семенович Шарпио Тамара Петровна Забрейко Светлана Алексеевна(73) Патентообладатель Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ботаники имени В.Ф.Купревича Национальной академии наук Беларуси(56) ЯКУШЕВА А.С. и др. Состояние и перспективы развития люпиносеяния ввеке. Тез. докл. Международной научно-практической конференции. - Брянск, 2001. - С. 62-64. ЯКУШЕВА А.С. Защита растений на рубежевека. Материалы научнопрактической конференции. - Минск Белбизнеспресс, 2001. - С. 273-275. ГРИЩЕНКО Е.Р. и др. Регуляция роста, развития и продуктивности растений. МатериалыМеждународной научной конференции. - Минск ИООО Право и экономика, 2007. - С. 46. ПУГАЧЕВ П.М. Биология продуктивности сельскохозяйственных культур Сб. науч. трудов. - Горки, 1994. С. 20-24. ИГНАТОВИЧ А.В. и др. Биология и совершенствование агротехники сельскохозяйственных культур. Вып. 2. Минск ИООО Право и экономика,2006. - С. 36-39. ЕВСИКОВ Д.О. и др. Известия Академии аграрных наук Республики Беларусь. - 2001. -4. - С. 57-62.(57) Способ определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу, отличающийся тем, что готовят первый образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами изи второй образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами изв присутствии белков, экстрагированных 10-25 мл 0,15-0,2 М раствораиз 0,5-2 г размолотых семян люпина, измеряют оптическую плотность образцов, рассчитывают показатель ингибиторной активности (ИА) экстрагированных из размолотых семян люпина белков по формуле, где- объем раствора , взятого для экстракции белков, мл- масса размолотых семян люпина, взятых для экстракции, г Дг - оптическая плотность первого образца До - оптическая плотность второго образца,16663 1 2012.12.30 и вывод об устойчивости люпина узколистного к антракнозу делают при получении значения показателя ИА выше 0,7. Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции люпина узколистного для определения устойчивости к антракнозу. Известен способ определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу, описанный в заявке на изобретение Способ отбора растений, устойчивых к фитопатогену,методом клеточной инженерии путем культивирования эксплантов и выращивания регенерантов, которые заражают инокулюмом фитопатогена, определение устойчивости производят инвитро на стадии регенерантов, начиная с появления первого листа отбирают устойчивые растения и доращивают их до семенного материала 1. Но данный способ обладает недостатком, заключающимся в том, что требует больших затрат времени и труда, так как основан на клеточной инженерии, требующей специального дорогостоящего оборудования и навыков. Эти недостатки частично устранены в способе определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу путем выращивания семян в лабораторных условиях на искусственной инфекционной среде и визуальной лабораторной оценки 8-дневных проростков на пораженность 2. Однако этот способ также обладает недостатком, заключающимся в том, что требует много времени, так как определение устойчивости производится на стадии 8-дневных проростков, а также требует относительно большого расхода семенного материала. Задачей настоящего изобретения является упрощение технологии процесса определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу и сокращение времени, требуемого для этого. Поставленная задача достигается тем, что в способе определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу готовят первый образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами изи второй образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами изв присутствии белков, экстрагированных 10-25 мл 0,15-0,2 М раствораиз 0,5-2 г размолотых семян люпина, измеряют оптическую плотность образцов, рассчитывают показатель ингибиторной активности (ИА) экстрагированных из размолотых семян люпина белков по формуле, где - объем раствора , взятого для экстракции белков, мл- масса размолотых семян люпина, взятых для экстракции, г Дг - оптическая плотность первого образца До - оптическая плотность второго образца,и вывод об устойчивости люпина узколистного к антракнозу делают при получении значения показателя ИА выше 0,7. Предлагаемый способ с использованием заявленных признаков в их совокупности и в заявленных интервалах времени, , объемов, компонентного состава смесей, температурного режима позволяет сократить время, требуемое для определения устойчивости семян люпина узколистного к антракнозу, и упростить технологию процесса. Изменение указанных интервалов в сторону уменьшения или увеличения не позволит достичь поставленной задачи. Пример осуществления способа определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу. Сухие семена люпина узколистного размалывают на мельнице до муки. Берут навеску муки 800 мг и экстрагируют 15 мл 0,2 М растворав течение 2 часов при 25 С. Экстракт центрифугируют при 5000 в течение 15 минут и получают таким образом надосадочную 2 16663 1 2012.12.30 жидкость (НЖ). Надосадочную жидкость сливают и осаждают 0,1 Н раствором НС 1 до ,равного 4,0. После полного осаждения полученный экстракт снова центрифугируют в течение 15 мин при 5000 , получают ингибиторную фракцию надосадочной жидкости. Затем из предварительно выращенного инфекционного агентаэкстрагируют протеолитические ферменты путем добавления фосфатного буфера с 6,8. Для осуществления способа определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу готовят первый образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами изи второй образец путем проведения реакции азоказеина с протеолитическими ферментами изв присутствии белков, экстрагированных 10-25 мл 0,15-0,2 М раствораиз 0,5-2 г размолотых семян люпина, измеряют оптическую плотность образцов, рассчитывают показатель ингибиторной активности (ИА) экстрагированных из размолотых семян люпина белков по формуле, где - объем раствора , взятого для экстракции белков, мл- масса размолотых семян люпина, взятых для экстракции, г Дг - оптическая плотность первого образца До - оптическая плотность второго образца,и вывод об устойчивости люпина узколистного к антракнозу делают при получении значения показателя ИА выше 0,7 (таблица). Сорт люпина узкоАктивность ингибиторов экзо- Степень устой- Тип устойчиволистного генных протеиназ чивости сти Эдельвейс 0,640,05 0 неустойчивые П-УБПЛ-12 0,680,04 0 неустойчивые П-УБПЛ-32 1,80,09 70 устойчивые Митан 1,560,06 72 устойчивые Першацвет 1,330,04 83 устойчивые Верас 0,500,01 6 неустойчивые Миртан 1,140,05 88 устойчивые П-УБПЛ-11 0,440,02 27 неустойчивые Способ позволяет определить устойчивость к антракнозу большого количества образцов за короткий промежуток времени (2 рабочих дня, в то время как в прототипе определяли за 8 суток). Для определения требуется незначительное количество семенного материала люпина (800 мг). Способ прост в исполнении, не требует дорогостоящих реактивов. Источники информации 1. Заявкана изобретение 94034770/13, МПК 01 1/0401 7/00, 1997. 2. Якушева А.С., Пономарева, Л.Т. Изучение коллекции белого (.) и узколистного (..) люпина на устойчивость к антракнозу Состояние и перспективы люпиносеяния ввеке. Тезисы докл. Международной науч.-практ. конф. Брянск, 17-19 июля 2001. Российская академия сельскохозяйственных наук Редкол. И.П. Такунов и др. - Брянск, 2001. - С. 62-64 (прототип). Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20. 3

МПК / Метки

МПК: G01N 33/48

Метки: способ, антракнозу, устойчивости, узколистного, определения, люпина

Код ссылки

<a href="http://bypatents.com/3-16663-sposob-opredeleniya-ustojjchivosti-lyupina-uzkolistnogo-k-antraknozu.html" rel="bookmark" title="База патентов Беларуси">Способ определения устойчивости люпина узколистного к антракнозу</a>

Похожие патенты